应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定量PCR双峰的处理方法
61/1返回列表
查看: 1592  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tingspdf

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 定量PCR双峰的处理方法

各位做定量PCR的同学，请看这个图，我的目标序列在左边的这个峰，后面这个峰应该会影响最后的荧光读数吧？应该怎么去避免？


[ Last edited by tingspdf on 2012-5-20 at 22:05 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-20 21:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tingspdf: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2012-05-21 23:14:11
tingspdf: 金币+5 2012-05-23 22:52:15
你这个曲线挺标准的了，不会影响啥吧，因为定量PCR是看ct值的，也就是起峰是在第几圈的，不是看荧光强度大小的，所以我觉得没问题，不用担心
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-21 14:18:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tingspdf

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-05-21 14:18:40:
你这个曲线挺标准的了，不会影响啥吧，因为定量PCR是看ct值的，也就是起峰是在第几圈的，不是看荧光强度大小的，所以我觉得没问题，不用担心

您仔细看一下，右边最高的那个蓝色的峰对应的那条线，左边的峰跟它一样高，应该有影响吧？
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-23 23:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tingspdf at 2012-05-23 23:19:57:
您仔细看一下，右边最高的那个蓝色的峰对应的那条线，左边的峰跟它一样高，应该有影响吧？

我认为没影响，这里呈现的图是手动添加的溶解曲线图，并不是扩增曲线；
并且机器读取荧光值是在每圈循环延伸过程后读取，温度大约75-80度(？记不清，好久不做了)；你这个杂峰温度更高，应该不会有明显影响
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-24 08:59:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tingspdf

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-05-24 08:59:37:
我认为没影响，这里呈现的图是手动添加的溶解曲线图，并不是扩增曲线；
并且机器读取荧光值是在每圈循环延伸过程后读取，温度大约75-80度(？记不清，好久不做了)；你这个杂峰温度更高，应该不会有明显影响

我是72度读取的荧光值 那个峰在72度时无法解链，应该有影响吧？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-24 11:40:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
没问题的，标准的解离曲线就应该是80+度起峰的，这个图的纵坐标不是荧光强度，刚反应过来……
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-24 19:44:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tingspdf 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 9/450 2026-03-18 15:05 by stone_128
[考研] 化工学硕306求调剂 +10 42838695 2026-03-12 10/500 2026-03-18 14:42 by haxia
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 302求调剂 +9 负心者当诛 2026-03-11 9/450 2026-03-17 17:13 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 326求调剂 +4 诺贝尔化学奖觊� 2026-03-15 7/350 2026-03-16 17:11 by 诺贝尔化学奖觊�
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭