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tawnya

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么我的PCR总是有的跑出来了，有的跑得不好？

换了很多模板，甚至把引物也换了，在同一块琼脂糖上，依旧是有的模板能跑出来，有的跑得不（目的条带有，但很模糊）。如果不是模板的问题，那是什么原因呢？
请大家帮我一下吧，我跑了两个月，快崩溃了。
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1楼 2012-05-10 21:02:37
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
内参？
梯度过，还有有阳性对照？ 条件没问题？
赞一下 回复此楼
我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-05-10 21:13:03
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uneei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-11 17:36:52
你做的啥模板呢？纯化过没呢？新鲜样品吗？最好上个图，大家帮你分析哦。
我以前也碰过你这样的情况，最后的原因就是，模板DNA降解了，因为我是手提的基因组DNA，提出来一眼都看出来不纯，刚做PCR还可以扩增出来，越到后面越是扩不出条带，到最后就跟你情况一样了。后来我分析是杂质太多，模板DNA到最后就降解了。
现在用试剂盒提，效果很好。
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3楼2012-05-11 14:07:30
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