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lw19850128

银虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看看我这个质粒怎么踢出来成了这样?

质粒大小为5892bp,amp抗性,转化感受态后,在抗性板上过夜培养,生长良好,可提出的质粒跑胶居然出现两条带,而且大小还不合适。。。怎么搞的啊?转化用的质粒之前电泳过大小正常。  这里为啥会出现两条带啊? marker用的是takara的1kb,片段依次为 1000,,2000,3000,4000,5000,6000,7000...最大为10000bp,望诸位高手给与解答~
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fly12365

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒是螺旋结构的,体积小,电泳迁移率比线性的快,可以酶切一下,看看目的片段有没有,确定是否连接上。上面那条带应该是感受态的基因组。
7楼2012-05-11 23:20:08
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酶切后电泳看看,现在的这张图不能最终确定。
活着就要让人感受到你的存在。
2楼2012-05-10 10:42:32
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒嘛,存在不同的形态,还有跑出三条带的。
大小对不对,单酶切后电泳才能看出来。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-05-10 11:10:41
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lw19850128

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2012-05-10 11:10:41:
质粒嘛,存在不同的形态,还有跑出三条带的。
大小对不对,单酶切后电泳才能看出来。

跑出三条带是因为酶切的原因吧?我的还没切过。。。。而且之前没出过这个问题啊。。。
4楼2012-05-10 11:34:42
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