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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近电泳跑出的条带老是这个样子，究竟是怎么回事呢
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遇见之殇

金虫 (小有名气)

[交流] 最近电泳跑出的条带老是这个样子，究竟是怎么回事呢

最近电泳出来的条带总是这个样子，用的是1%的琼脂糖凝胶，电泳液为1倍的TBE，电压120V，电流90mA，以前也是这样的条件，结果都挺好的，现在不知道是怎么回事，大家帮忙看看吧，谢谢啦！
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1楼2012-05-09 12:47:58
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ysy000000

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-09 19:06:59
可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试
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6楼2012-05-09 15:23:56
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zqx128

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-10 13:50:40
片段越小需要用的胶浓度越大。因为胶浓度越大，形成的孔径就越小，这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来，并达到一定的精确度。分子生物学实验手册有对应的表格。
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21楼2012-05-10 08:39:16
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普通回帖

rb

木虫 (著名写手)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
是不是胶泥的时间不够就拔梳子了?
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2楼2012-05-09 12:50:40
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longrna

新虫 (正式写手)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
跑的是什么样品啊？多大？
最好点个marker嘛
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3楼2012-05-09 13:22:52
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rb at 2012-05-09 12:50:40:
是不是胶泥的时间不够就拔梳子了?

胶凝的很好了，应该不是这个问题吧
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4楼2012-05-09 13:44:15
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 13:22:52:
跑的是什么样品啊？多大？
最好点个marker嘛

这是个actin，178bp,maker跑出来也是这样的。
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5楼2012-05-09 13:46:01
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137167741

至尊木虫 (著名写手)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
不是用TAE吗？
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7楼2012-05-09 16:20:04
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longrna

新虫 (正式写手)
★ ★
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-05-09 19:07:10
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦（2.5-3%胶都有人跑），点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。
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遇见之殇
8楼2012-05-09 16:32:28
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chenqian5861

木虫 (小有名气)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
换琼脂糖了？要不就是缓冲液有问题，建议重新配一下缓冲液
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9楼2012-05-09 16:36:50
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
上样量过大
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10楼2012-05-09 17:56:06
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
上样量有点大，其他没啥问题吧。建议楼主把maker的图以及以前正常时的图也传上来看看哦。
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11楼2012-05-09 19:08:29
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ysy000000 at 2012-05-09 15:23:56:
可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试

好，O(∩_∩)O谢谢
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12楼2012-05-09 20:42:55
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 137167741 at 2012-05-09 16:20:04:
不是用TAE吗？

我用的是TBE啦
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13楼2012-05-09 20:43:20
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 16:32:28:
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦（2.5-3%胶都有人跑），点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

我试试看，O(∩_∩)O谢谢
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14楼2012-05-09 20:43:48
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by chenqian5861 at 2012-05-09 16:36:50:
换琼脂糖了？要不就是缓冲液有问题，建议重新配一下缓冲液

缓冲液都换过一遍了，还是这个样子
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15楼2012-05-09 20:44:26
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匿名

用户注销 (小有名气)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
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16楼2012-05-09 20:45:32
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
你这是吧样品  跑的都挤到一起了？
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17楼2012-05-09 21:38:10
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欢仔

银虫 (正式写手)
★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
8楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 16:32:28:
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦（2.5-3%胶都有人跑），点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

想问下 是不是目的片段越小 用的胶浓度越大 我不太明白这个是为什么
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18楼2012-05-10 01:30:10
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zqx128

金虫 (正式写手)
同意8楼的说法。
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19楼2012-05-10 08:33:12
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damaomao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
20楼2012-05-10 08:37:57
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知道楼主的问题解决了没？如果解决了请和大家分享下原因哟，谢谢！
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22楼2012-05-10 09:59:39
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
缓冲液换一下吧，估计用久了，离子浓度太高了
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23楼2012-05-10 11:16:00
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 16:32:28:
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦（2.5-3%胶都有人跑），点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

试了一下，稍微好一点了，谢谢！
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24楼2012-05-10 17:49:53
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遇见之殇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by xiongyaoling at 2012-05-10 09:59:39:
不知道楼主的问题解决了没？如果解决了请和大家分享下原因哟，谢谢！

好了，我换了3%的胶，电压降低到70V，缓冲液也统统重新配置跑出来就正常了
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25楼2012-05-10 17:56:55
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elon_ma

禁言 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
26楼2012-05-10 23:19:53
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
降低上样量，提高凝胶浓度
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27楼2012-05-11 09:33:14
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songwang0516

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
话说为什么是绿色的带啊？
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28楼2012-12-17 17:03:57
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