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遇见之殇

金虫 (小有名气)


[交流] 最近电泳跑出的条带老是这个样子,究竟是怎么回事呢

最近电泳出来的条带总是这个样子,用的是1%的琼脂糖凝胶,电泳液为1倍的TBE,电压120V,电流90mA,以前也是这样的条件,结果都挺好的,现在不知道是怎么回事,大家帮忙看看吧,谢谢啦!
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ysy000000

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-09 19:06:59
可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试
6楼2012-05-09 15:23:56
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zqx128

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-10 13:50:40
片段越小需要用的胶浓度越大。因为胶浓度越大,形成的孔径就越小,这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来,并达到一定的精确度。分子生物学实验手册有对应的表格。
21楼2012-05-10 08:39:16
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普通回帖

rb

木虫 (著名写手)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
是不是胶泥的时间不够就拔梳子了?
2楼2012-05-09 12:50:40
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longrna

新虫 (正式写手)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
跑的是什么样品啊?多大?
最好点个marker嘛
3楼2012-05-09 13:22:52
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by rb at 2012-05-09 12:50:40:
是不是胶泥的时间不够就拔梳子了?

胶凝的很好了,应该不是这个问题吧
4楼2012-05-09 13:44:15
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 13:22:52:
跑的是什么样品啊?多大?
最好点个marker嘛

这是个actin,178bp,maker跑出来也是这样的。
5楼2012-05-09 13:46:01
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遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
不是用TAE吗?
7楼2012-05-09 16:20:04
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longrna

新虫 (正式写手)


★ ★
西瓜: 金币+2, Good! 2012-05-09 19:07:10
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2012-05-09 16:32:28
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chenqian5861

木虫 (小有名气)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
换琼脂糖了?要不就是缓冲液有问题,建议重新配一下缓冲液
9楼2012-05-09 16:36:50
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
上样量过大
10楼2012-05-09 17:56:06
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遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
上样量有点大,其他没啥问题吧。建议楼主把maker的图以及以前正常时的图也传上来看看哦。
11楼2012-05-09 19:08:29
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
6楼: Originally posted by ysy000000 at 2012-05-09 15:23:56:
可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试

好,O(∩_∩)O谢谢
12楼2012-05-09 20:42:55
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 137167741 at 2012-05-09 16:20:04:
不是用TAE吗?

我用的是TBE啦
13楼2012-05-09 20:43:20
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
8楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 16:32:28:
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

我试试看,O(∩_∩)O谢谢
14楼2012-05-09 20:43:48
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by chenqian5861 at 2012-05-09 16:36:50:
换琼脂糖了?要不就是缓冲液有问题,建议重新配一下缓冲液

缓冲液都换过一遍了,还是这个样子
15楼2012-05-09 20:44:26
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匿名

用户注销 (小有名气)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
16楼2012-05-09 20:45:32
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
你这是吧样品  跑的都挤到一起了?
17楼2012-05-09 21:38:10
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欢仔

银虫 (正式写手)



遇见之殇(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
8楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 16:32:28:
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

想问下 是不是目的片段越小 用的胶浓度越大 我不太明白这个是为什么
18楼2012-05-10 01:30:10
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zqx128

金虫 (正式写手)


同意8楼的说法。
19楼2012-05-10 08:33:12
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damaomao

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

20楼2012-05-10 08:37:57
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道楼主的问题解决了没?如果解决了请和大家分享下原因哟,谢谢!
22楼2012-05-10 09:59:39
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
缓冲液换一下吧,估计用久了,离子浓度太高了
23楼2012-05-10 11:16:00
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by longrna at 2012-05-09 16:32:28:
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。

试了一下,稍微好一点了,谢谢!
24楼2012-05-10 17:49:53
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遇见之殇

金虫 (小有名气)


引用回帖:
22楼: Originally posted by xiongyaoling at 2012-05-10 09:59:39:
不知道楼主的问题解决了没?如果解决了请和大家分享下原因哟,谢谢!

好了,我换了3%的胶,电压降低到70V,缓冲液也统统重新配置跑出来就正常了
25楼2012-05-10 17:56:55
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elon_ma

禁言 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

26楼2012-05-10 23:19:53
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
降低上样量,提高凝胶浓度
27楼2012-05-11 09:33:14
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songwang0516

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
话说为什么是绿色的带啊?
28楼2012-12-17 17:03:57
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