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thestormcong银虫 (小有名气)
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[求助]
pcr退火时间
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| 大家好，请教一个pcr的问题。我的引物长度约为70多个bp，那么在设计程序的时候，引物的退火时间大概要多长呢，谢谢！ |
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9楼2012-05-08 21:41:19
jmmchen
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thestormcong
2楼2012-05-08 21:09:32
张宏宇123
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【答案】应助回帖
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Tm=4（G+C）+2(A+T),Tm值比退火温度高5-15度。 退火温度一般为55度-60度，GC<50％,一般用55度；GC>50％，一般用60度。若有非特异性带，可提高退火温度，但最好不要高于68度，合适的退火温度在45-68度。 |
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3楼2012-05-08 21:12:58
张宏宇123
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4楼2012-05-08 21:14:30
