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BamH1酶切不充分
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大家好，我的实验现在遇到一个难题，想不通，质粒里面只有一个BamH1酶切位点BamH1是插入一段序列引入的一个位点，本来想着再利用BamH1和Xho1双酶切再引入一个长一点的片段，可是自连接长菌较多，后来对质粒分别做了BamH1和Xho1的单酶切鉴定，得到图1中所示:1、2不同菌落所提的质粒，3、4是1、2质粒分别BamH1单酶切，5、6是Xho1单酶切。图2是插入带有BamH1片段前后的质粒做Xho1单酶切对照。 大家帮我分析一下是酶切不充分吗？酶没有问题，做其他的质粒单酶切能切开。而且看图2应该是带有BamH1的片段插入进去了。 我感觉目前最好的方法是测序，但是我跟导师提了几次测序，她都不同意；我又猜想是不是甲基化了，但是导师说同是用TOP10提的质粒，别的都没有甲基化问题，所以把这个原因也排除了。我现在不知道问题出在哪？  图片1  图片2 |
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2楼2012-05-07 19:59:47
