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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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莞尔9001

银虫 (小有名气)

[求助] 重组质粒酶切的电泳图

重组质粒酶切之后的电泳图拖尾严重,求原因
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-01 20:12:33
莞尔9001: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-01 20:25:19
应该是切抹了,我想问一下你质粒是你手工自己配的试剂提的还是试剂盒提的,我们实验室都是用自己配的溶液提质粒,有时候也会遇到这种现象,时间切的太长也会发生抹带现象
未来不是梦
2楼2012-05-01 17:30:23
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莞尔9001

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-01 17:30:23:
应该是切抹了,我想问一下你质粒是你手工自己配的试剂提的还是试剂盒提的,我们实验室都是用自己配的溶液提质粒,有时候也会遇到这种现象,时间切的太长也会发生抹带现象

嗯,手提的,是酶切的时间太长吗?以前也没有这样,酶切时间也一样,最近两次提的都这样。还是手提质粒过程中的问题?
3楼2012-05-01 20:24:17
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

对,手提质粒提的质量不好就容易切抹,我们实验室也总出现这样的情况,你看看你实验室的试剂是不是时间太长了,或者你让其他人帮你提一下,不同人提的也不一样。也可以缩短时间试试,切两个小时。其实如果你质粒提的好的话,切过夜都没问题。
未来不是梦
4楼2012-05-01 22:18:35
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mhmtf

铜虫 (小有名气)

还有一种情况就是没有连接上,我又一次也是这样子 送出去测序也测不出来 最后直接重做了一次就切出来了~~
gdfh
5楼2012-05-02 10:12:17
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莞尔9001

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mhmtf at 2012-05-02 10:12:17:
还有一种情况就是没有连接上,我又一次也是这样子 送出去测序也测不出来 最后直接重做了一次就切出来了~~

没有连接上,不应该也是只有质粒一条带吗?怎么会出现下面这么模糊的情况
6楼2012-05-03 16:22:46
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chs4502

金虫 (小有名气)

可能是酶切的时间过长了,还有就是用手配溶液提取质粒效果不是很好,建议用试剂盒提取。
7楼2012-05-23 09:58:34
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