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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重组质粒酶切的电泳图
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莞尔9001

银虫 (小有名气)

[求助] 重组质粒酶切的电泳图

重组质粒酶切之后的电泳图拖尾严重，求原因
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1楼 2012-05-01 15:50:16
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-01 20:12:33
莞尔9001: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-01 20:25:19
应该是切抹了，我想问一下你质粒是你手工自己配的试剂提的还是试剂盒提的，我们实验室都是用自己配的溶液提质粒，有时候也会遇到这种现象，时间切的太长也会发生抹带现象
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未来不是梦
2楼2012-05-01 17:30:23
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莞尔9001

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-01 17:30:23:
应该是切抹了，我想问一下你质粒是你手工自己配的试剂提的还是试剂盒提的，我们实验室都是用自己配的溶液提质粒，有时候也会遇到这种现象，时间切的太长也会发生抹带现象

嗯，手提的，是酶切的时间太长吗？以前也没有这样，酶切时间也一样，最近两次提的都这样。还是手提质粒过程中的问题？
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3楼2012-05-01 20:24:17
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张宏宇123

金虫 (著名写手)
对，手提质粒提的质量不好就容易切抹，我们实验室也总出现这样的情况，你看看你实验室的试剂是不是时间太长了，或者你让其他人帮你提一下，不同人提的也不一样。也可以缩短时间试试，切两个小时。其实如果你质粒提的好的话，切过夜都没问题。
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未来不是梦
4楼2012-05-01 22:18:35
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mhmtf

铜虫 (小有名气)
还有一种情况就是没有连接上，我又一次也是这样子 送出去测序也测不出来 最后直接重做了一次就切出来了~~
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gdfh
5楼2012-05-02 10:12:17
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莞尔9001

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mhmtf at 2012-05-02 10:12:17:
还有一种情况就是没有连接上，我又一次也是这样子 送出去测序也测不出来 最后直接重做了一次就切出来了~~

没有连接上，不应该也是只有质粒一条带吗?怎么会出现下面这么模糊的情况
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6楼2012-05-03 16:22:46
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chs4502

金虫 (小有名气)
可能是酶切的时间过长了，还有就是用手配溶液提取质粒效果不是很好，建议用试剂盒提取。
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7楼2012-05-23 09:58:34
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