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桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取RNA时 用DEPC水溶解,条件是什么,要多长时间呢 已有1人参与

提取RNA,用DEPC融多长时间,是放在冰盒上融还是在室温啊
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-09-11 10:35:49
直接用DEPC肯定不行呀! DEPC处理的水配制方法:按1:1000的比例配置(1毫升DEPC溶解在1000毫升超纯水中)搅拌过夜,120℃高温灭菌40分钟,得到的水是DEPC处理过的水(RNAase free)的水。用这个水溶解提取的RNA。: ...

十分感谢!然后我想问一下,这两种有什么区别吗?或者只用DEPC有什么影响呢?
8楼2012-09-12 09:47:14
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查看全部 19 个回答

cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-28 10:22:25
室温就行,因为你前一步是洗涤,用75%的酒精,用DEPC溶解时要保证酒精尽可能的挥发干净,不然PCR效果不好,RNA非常好溶,加上水就好了,所以你完全不必在冰上等,加上水后立即-80保存就好了
我努力我奋斗我成功
2楼2012-04-28 09:35:14
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桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cheng_xiao at 2012-04-28 09:35:14:
室温就行,因为你前一步是洗涤,用75%的酒精,用DEPC溶解时要保证酒精尽可能的挥发干净,不然PCR效果不好,RNA非常好溶,加上水就好了,所以你完全不必在冰上等,加上水后立即-80保存就好了

嗯嗯 那我加多少DEPC溶解呢,50微DEPC溶解,浓度会不会太小
3楼2012-05-04 10:58:49
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 桐苇铅铅 at 2012-05-04 10:58:49:
嗯嗯 那我加多少DEPC溶解呢,50微DEPC溶解,浓度会不会太小

在提取RNA的时候最后一步,等晾干后直接溶在RNAfree水(DEPC处理过的水)中就可以,我们这边做一般溶在20-25微升DEPC处理过的水中即可,如果水太多  可能导致RNA浓度过低,电泳检测不清楚的问题。就这些,呵呵,祝君好运!!
勤能补拙
4楼2012-05-04 12:45:14
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