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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA时 用DEPC水溶解，条件是什么，要多长时间呢
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桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取RNA时 用DEPC水溶解，条件是什么，要多长时间呢 已有1人参与

提取RNA,用DEPC融多长时间，是放在冰盒上融还是在室温啊
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1楼 2012-04-28 09:16:23
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stewart3261

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-09-11 10:35:49
直接用DEPC肯定不行呀！ DEPC处理的水配制方法：按1:1000的比例配置（1毫升DEPC溶解在1000毫升超纯水中）搅拌过夜，120℃高温灭菌40分钟，得到的水是DEPC处理过的水（RNAase free）的水。用这个水溶解提取的RNA。: ...

十分感谢！然后我想问一下，这两种有什么区别吗？或者只用DEPC有什么影响呢？
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8楼2012-09-12 09:47:14
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-28 10:22:25
室温就行，因为你前一步是洗涤，用75%的酒精，用DEPC溶解时要保证酒精尽可能的挥发干净，不然PCR效果不好，RNA非常好溶，加上水就好了，所以你完全不必在冰上等，加上水后立即-80保存就好了
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我努力我奋斗我成功
2楼2012-04-28 09:35:14
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桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cheng_xiao at 2012-04-28 09:35:14:
室温就行，因为你前一步是洗涤，用75%的酒精，用DEPC溶解时要保证酒精尽可能的挥发干净，不然PCR效果不好，RNA非常好溶，加上水就好了，所以你完全不必在冰上等，加上水后立即-80保存就好了

嗯嗯 那我加多少DEPC溶解呢，50微DEPC溶解，浓度会不会太小
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3楼2012-05-04 10:58:49
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 桐苇铅铅 at 2012-05-04 10:58:49:
嗯嗯 那我加多少DEPC溶解呢，50微DEPC溶解，浓度会不会太小

在提取RNA的时候最后一步，等晾干后直接溶在RNAfree水（DEPC处理过的水）中就可以，我们这边做一般溶在20-25微升DEPC处理过的水中即可，如果水太多  可能导致RNA浓度过低，电泳检测不清楚的问题。就这些，呵呵，祝君好运！！
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勤能补拙
4楼2012-05-04 12:45:14
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