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桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)

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[求助] 提取RNA时用DEPC水溶解，条件是什么，要多长时间呢已有1人参与

提取RNA,用DEPC融多长时间，是放在冰盒上融还是在室温啊

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1楼 2012-04-28 09:16:23

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stewart3261

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4楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-04 12:45:14
在提取RNA的时候最后一步，等晾干后直接溶在RNAfree水（DEPC处理过的水）中就可以，我们这边做一般溶在20-25微升DEPC处理过的水中即可，如果水太多可能导致RNA浓度过低，电泳检测不清楚的问题。就这些，呵呵，祝 ...

你好，我想问一下DEPC处理的水是按什么比例配制的？直接用DEPC水溶解RNA可以吗？

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6楼2012-09-10 20:10:12

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stewart3261

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7楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-09-11 10:35:49
直接用DEPC肯定不行呀！ DEPC处理的水配制方法：按1:1000的比例配置（1毫升DEPC溶解在1000毫升超纯水中）搅拌过夜，120℃高温灭菌40分钟，得到的水是DEPC处理过的水（RNAase free）的水。用这个水溶解提取的RNA。: ...

十分感谢！然后我想问一下，这两种有什么区别吗？或者只用DEPC有什么影响呢？

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8楼2012-09-12 09:47:14

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stewart3261

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9楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-09-12 12:40:08
首先DEPC是一种RNA酶抑制剂，它会抑制RNA降解，因此它也有很强的毒性（呼吸道致癌），因此在操作的时候一定要带上防毒面具。其次，DEPC是一种脂溶性物质，它很难溶于水，因此要搅拌过夜，使之充分溶解。而RNA它是溶 ...

谢谢，学习了！

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10楼2012-09-13 10:20:46

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