应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求解！Pcr循环数问题...
91/1返回列表
查看: 4111  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

咮唦

新虫 (初入文坛)

[求助] 急求解！Pcr循环数问题... 已有1人参与

Pcr循环数过多会对结果产生什么影响？拖带有可能是循环数过多引起的吗？我的模板是经纯化过的，会不会是模板浓度太高的问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-27 19:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-28 09:21:59
延伸时间太长时，会出现涂布现象
循环次数太多可使产物序列中引入错误
赞一下 回复此楼
未来不是梦
2楼2012-04-27 19:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxfans

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-28 09:22:09
体外扩增有种说法是平台效应，即扩增循环增加，而模板量不再增加，所以一般PCR扩增循环数在34~40，模板浓度高会使目的条带很亮（也很粗），但应该不会使拖尾，会不会是DNA提取 纯化过程有片段化（断裂）
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-27 21:31:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-04-28 09:22:28
"Pcr循环数过多会对结果产生什么影响？拖带有可能是循环数过多引起的吗？我的模板是经纯化过的，会不会是模板浓度太高的问题？"
Pcr循环数过多会对结果产生非特异性扩增，模板浓度太高、镁离子浓度高、退火时间长、退火温度低、延伸时间长也会产生非特异性扩增，结果都会在电泳产生拖带。
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-27 23:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kly312254857

铁虫 (初入文坛)
★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励新虫交流~不过这种就不算应助回帖了哈 2012-05-04 18:34:46
自己摸索几个条件就好了
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-27 23:48:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxbgjx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
太多会使pcr出现错误，使非特异性片段产生，28——32最好，温度可以做TOUCHDOWN
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-28 14:54:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻舞小仙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-04 18:35:11
我有遇到跟你一样的问题，尤其我挑斑做模板做PCR后，跑胶验证时直接全是黑色甬道，估计跟我挑斑下手太重有关。模板浓度太高会导致PCR产物跟模板结合而非引物，引起非特异性扩增增多，严重时没有条带。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2012-05-04 14:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hollyjiang

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PCR后电泳拖带出现的原因有很多，如引物特异性不好、模板浓度过高、还有可能是退火温度过高等等。循环数和拖带关系不大。多尝试几次不同PCR条件应该就好了，祝你好运
赞一下 回复此楼
一定要签名嘛
8楼2012-05-10 20:05:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

〇秋基地

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

看前辈们总结的。
出现片状拖带或涂抹带
　　PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，循环次数过多，退火温度过低，引起。其对策有：减少酶量，或调换另一来源的酶。减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓 度。增加模板量，减少循环次数。
望有用。
赞一下 回复此楼
喜欢选择的，选择喜欢的！
9楼2014-08-18 15:58:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 咮唦 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 求调剂 +5 yunziaaaaa 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:57 by ccp273206157
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭