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SDS-PAGE凝胶电泳求教
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ywmwiw
新虫
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[交流]
SDS-PAGE凝胶电泳求教
已有9人参与
最近一直在跑凝胶电泳,Marker的条带应该有6条,可是跑了无数次都只跑出了5条,只有偶尔能跑出6条(跑出6条的机率跟中大奖差不多),曾请教过一位师姐,得知电流太大,之后按浓缩胶(50v,28-33mA)分离胶(80v,38-43mA)跑了几次都不成功(师姐能跑出来了),胶的各种配方和每块胶都是本人自己配的(包括师姐跑的那次),请问各位高手这是为什么呢?
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1楼
2012-04-25 11:16:26
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horsw
木虫
(正式写手)
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(幼儿园)
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帖子: 859
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虫号: 363169
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性别: GG
专业: 养蚕学
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分离胶缓冲液pH没调准的可能性很大
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5楼
2012-04-26 00:10:08
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rice1007
禁虫
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2012-04-25 13:51:34
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2楼
2012-04-25 11:28:57
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0624410024
金虫
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Begging for knowledge
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红花: 3
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在线: 136.6小时
虫号: 942812
注册: 2010-01-15
性别: GG
专业: 抗体工程学
★
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那就是你的人品问题了~~~
~~~~~
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3楼
2012-04-25 16:32:10
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rhguo
铜虫
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虫号: 1311037
注册: 2011-05-31
专业: 畜牧学
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流
2012-04-26 15:52:38
同样的问题我也碰到过,到现在也是这样,这种情况往往会以胶的底部有一条线,线,最后一条Marker就在那条线上面,染色的时候线以下什么条带都没有了,线以上正常染色;至于 为什么会形成那条线,我现在也不知道;估计是前面的蛋白都积在一起了,分不开,可能是SDS不够处理样品的时候可以多加一些上样缓冲液,在电泳缓冲液里稍微多加一些SDS看下效果
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4楼
2012-04-25 19:53:47
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