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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] rt-pcr电泳图,求好心虫友帮助分析一下,跪谢。。。

这是今天跑得rt-pcr图,最两边的的是DL2000marker,2-9号点样孔为温度梯度(45-60度),由于提的rna有dna污染,所以消化了一下。。。1号点样孔为没有经过dnase消化的rna,也没有经过反转录,当做对比。。。 目的条带约860bp左右,1号点样孔有明显目的条带,但也有杂带,模板应该是基因组dna,但2-9号几乎没有目的条带,我想问一下是不是反转录又问题啊,由于没有内参,所以不知道是不是反转录有问题。。。 还有植物里有没有通用的内参啊,比如18s,序列为多少啊,我做的油松,找不到内参基因,求大神指点啊。。。

rna



梯度pcr
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免疫游侠

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-23 18:45:40
分析了一下你的结果,由于你的marker是跑出来了的,1号样本没有经过dnase消化也跑出来了,而2-9号样本是经过dnase消化而没有跑出来,因此可能是你在消化过程中DNA把RNA也给消化掉了,建议做预实验或是重做实验,再找原因,祝实验顺利!
吾尝终日而思不如须臾之所学!
2楼2012-04-23 12:25:12
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