[求助] rt-pcr电泳图，求好心虫友帮助分析一下，跪谢。。。

2楼: Originally posted by 免疫游侠 at 2012-04-23 12:25:12:
分析了一下你的结果，由于你的marker是跑出来了的，1号样本没有经过dnase消化也跑出来了，而2-9号样本是经过dnase消化而没有跑出来，因此可能是你在消化过程中DNA把RNA也给消化掉了，建议做预实验或是重做实验，再 ...

6楼: Originally posted by freerain at 2012-04-24 01:56:58:
消化DNA要买Rnase free的Dnase I，并添加Rnase抑制剂
否则在消化过程中DNA把RNA也给消化掉了

5楼: Originally posted by zgb1982 at 2012-04-23 22:29:44:
没有内参也确实不好说是不是cDNA的问题哦,是不是你DNA消化的时候没进行失活,把CDNA也消化了.不是说RNA也会扩出条带的吗

12楼: Originally posted by syn1985 at 2012-04-25 13:19:58:
RNA质量没问题反转录都不会有问题的
1)按照你所说你前面不消化DNA的能扩出来，而消化过的反而扩不出来的情况可以认为你的引物是没有问题的；
2）不知道你1-9号孔是不是所有的模板都一样的浓度，如果不一样考虑一 ...

10楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-04-24 21:02:01:
我是做动物的，不知道植物的，但是，首先，你要确定你的RNA反转的好不好，先做个内参，跑个25-30CYCLE
要是觉得提的RNA不好，可以跑个电泳看看
你加酶消化的时候，处理的东西包括水，都是无RNase的吧？
再说说 ...