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扩增曲线不平滑是怎么回事？
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我又来了。。。 今天又做了一批荧光PCR，最后的结果是大致的曲线走向都对的，就是有个问题曲线不够平滑。图在下面。以前做了几次也有这个问题呢~请问这会是什么原因？ P.S.我用的是ABI7500做的，想同时做出扩增曲线和溶解曲线，请问有木有熟悉仪器的大虾，应该怎么setup才行呢？貌似实验type只能是一种。。。  配工作液还不太熟练，我怕配错；于是想一管一管加，这样至少不会有差错。     这是4个重复的反应，用的是50ul体系     这也是4个重复的，但是100ul体系，貌似效果比50 的好 [ Last edited by 可帅儿 on 2012-4-19 at 13:42 ] |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+3, Good！加不加差别确实不大，不过加了的话重复性好很多，个人经验~ 2012-05-07 17:56:43
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+3, Good！加不加差别确实不大，不过加了的话重复性好很多，个人经验~ 2012-05-07 17:56:43
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大姐啊 幸亏回来看到这帮人在这说了 你应该看看试剂说明书的 ROX染料一般都是直接加入的 我用的TOYOBO Mix就是这样的 你可以看看试剂盒里哪里有什么额外的ROX让你加的啦........... 如果你的Mix是呈现微微一点红色的话 本身就说明有ROX染料的啦.................................. 如果有问题 只能是你没有设定去读ROX 而不是没加ROX 再者有没有读ROX的影响我试过 比较微小（也不排除实验条件未优化造成的大差异） 本来ROX是用来矫正孔间差异的，若是有ROX和没有ROX下区别那么大 这个做机器的公司就可以去死了....................... 个人看法 若有说错请高手指点  [ Last edited by atlanticwi on 2012-5-6 at 21:22 ] |
38楼2012-05-06 21:14:41
2楼2012-04-19 13:44:05
3楼2012-04-19 15:53:18
可帅儿4楼2012-04-19 16:19:06