24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 17493  |  回复: 55
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)


[交流] 扩增曲线不平滑是怎么回事?

我又来了。。。
今天又做了一批荧光PCR,最后的结果是大致的曲线走向都对的,就是有个问题曲线不够平滑。图在下面。以前做了几次也有这个问题呢~请问这会是什么原因?
P.S.我用的是ABI7500做的,想同时做出扩增曲线和溶解曲线,请问有木有熟悉仪器的大虾,应该怎么setup才行呢?貌似实验type只能是一种。。。
配工作液还不太熟练,我怕配错;于是想一管一管加,这样至少不会有差错。










这是4个重复的反应,用的是50ul体系












这也是4个重复的,但是100ul体系,貌似效果比50 的好



[ Last edited by 可帅儿 on 2012-4-19 at 13:42 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)


引用回帖:
28楼: Originally posted by txw87 at 2012-05-04 00:34:23:
还有啊,你做taqman法还想做熔解曲线那是不可能的

哦哦谢了,我会注意的
29楼2012-05-04 10:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 56 个回答

可帅儿

银虫 (正式写手)


哎~~自己来顶顶!求大神指点(⊙o⊙)哦
2楼2012-04-19 13:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+4, Good! 2012-04-19 17:27:17
首先我认为扩增曲线不光滑可能时因为还在基线期,其次,你要加溶解曲线的话可以在experiment menu的experiment properties里面选择检测试剂SYBRgreen下面就可以看到include melt curve在前面小框里打钩,第三,工作液可以先mix再分到每个孔里,cDNA最后加

[ Last edited by chlorella409 on 2012-4-19 at 15:55 ]
3楼2012-04-19 15:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, Good! 2012-04-19 17:26:48
嗯...........
感觉体系过大了哦,100uL体系完全没有必要的,同时你用的什么MasterMix呢,还有感觉前面几个图不是不平滑,而是没有起峰呢

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-04-19 16:19:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 学硕274求调剂 +4 Li李鱼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:41 by 红玉佳人
[考研] 287求调剂 +10 land xuxu 2026-03-26 10/500 2026-03-27 15:33 by 帕尔马拉特
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-27 7/350 2026-03-27 15:27 by Joe率
[考研] 339求调剂 +4 烤麦芽 2026-03-27 5/250 2026-03-27 13:23 by 752105528
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
信息提示
请填处理意见