应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot实验技术
51/1返回列表
查看: 2853  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot实验技术

刚开始煮蛋白会起泡泡,溢出正常么？还有我的目的蛋白是75KD我250mA的电流转膜一个半小时可以将目的蛋白转过去么？显影的时候我的内参条带很好，但是目的蛋白没有，是什么原因？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-14 13:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一抗还是避免多克隆的吧。实在不行用封闭液稀释一抗，会减少杂带的。
还是不行就换个单克隆的一抗
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-16 10:12:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

sxwsp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-12 15:28:36
内参45左右，而你的蛋白75，应该不是转膜的问题。一个班小时足够了。目的蛋白没有显影的最大可能就是抗体，抗体不行或者孵抗条件不对
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-22 13:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellolin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-12 15:28:52
煮样冒泡正常啊，用封口膜封好就行了。另外想知道转膜有没有问题直接点个预染marker，看看预染marker转的效果不就知道了。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

sunxiao1987
scienceguy
3楼2012-04-22 22:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hellolin at 2012-04-22 22:57:47:
煮样冒泡正常啊，用封口膜封好就行了。另外想知道转膜有没有问题直接点个预染marker，看看预染marker转的效果不就知道了。

先谢谢啦，我用了预染marker,marker 都转过去了的。现在，目的条带有显出来，但是很淡，而且背景很高，今天延长了封闭时间和降低了二抗浓度，背景市有所降低，但是目的条带变的更淡了，不知道是不是二抗的特异性不好呢？
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-10 23:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭