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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎样克隆基因家族中的一个特定基因
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longenen

新虫 (初入文坛)

[交流] 怎样克隆基因家族中的一个特定基因 已有2人参与

用其他物种的保守区域设计兼并引物PCR，直接测序，未得到结果，后转化，筛选重组子，拿两个重组子测序，均是阳性重组子，但是两个重组子插入序列不同，BLAST后发现属于有部分同源，感觉属于一个基因家族，但是我的目的是找到基因家族中某一个特定的基因，进行后续试验，请问我怎么样才能达到目的呢？
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1楼 2012-04-13 21:28:10
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guojing113

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
兼并PCR+竞争PCR就可以克隆在同一菌株中同一基因家族的不同基因
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听雨
4楼2012-04-15 12:47:58
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有两个特异性可用，第一是特异基因之特异引物，RT-PCR出特异的基因。第二，如果难于找到基因特异性，那就从特异组织中扩增得到。还有就是建立cDNA文库，用探针调出所要基因。
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3楼2012-04-15 06:19:43
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