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longenen

新虫 (初入文坛)

[交流] 怎样克隆基因家族中的一个特定基因 已有2人参与

用其他物种的保守区域设计兼并引物PCR,直接测序,未得到结果,后转化,筛选重组子,拿两个重组子测序,均是阳性重组子,但是两个重组子插入序列不同,BLAST后发现属于有部分同源,感觉属于一个基因家族,但是我的目的是找到基因家族中某一个特定的基因,进行后续试验,请问我怎么样才能达到目的呢?
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有两个特异性可用,第一是特异基因之特异引物,RT-PCR出特异的基因。第二,如果难于找到基因特异性,那就从特异组织中扩增得到。还有就是建立cDNA文库,用探针调出所要基因。
3楼2012-04-15 06:19:43
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guojing113

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
兼并PCR+竞争PCR就可以克隆在同一菌株中同一基因家族的不同基因
听雨
4楼2012-04-15 12:47:58
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