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1楼2012-04-12 20:37:29

gaobingmiao

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【答案】应助回帖

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seagrove: 金币+2, 鼓励新虫多多交流~ 2012-04-12 22:46:36

一般情况下煮5分钟就可以了建议不要超过10分钟，时间太长蛋白煮化掉了，时间也不应少于3分钟，要不变性的不好，也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质，正常情况下可以不离心，有些时间比如直接拿菌液煮后还是最好离心一下去掉不容的杂质！

2楼2012-04-12 21:48:17

yjchsh

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引用回帖:

2楼: Originally posted by gaobingmiao at 2012-04-12 21:48:17:
一般情况下煮5分钟就可以了建议不要超过10分钟，时间太长蛋白煮化掉了，时间也不应少于3分钟，要不变性的不好，也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质，正常情况下可以不离心，有些时间比如直接拿 ...

时间太长蛋白煮化掉了???

3楼2012-04-13 08:13:56

s_cope

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【答案】应助回帖

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同意一楼的观点

嘿嘿

4楼2012-04-13 09:44:17

lixingliang

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【答案】应助回帖

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我们实验室一般都是煮蛋白8分钟，然后12000rpm离心1分钟，抛出的条带很漂亮

我不管你看起看不起我，我都是个演员

5楼2012-04-13 21:44:09

danyzj01

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引用回帖:

5楼: Originally posted by lixingliang at 2012-04-13 21:44:09:
我们实验室一般都是煮蛋白8分钟，然后12000rpm离心1分钟，抛出的条带很漂亮

12000RPM是单纯的1分钟还是机器转速达到12000RPM之前的时间也计算？

6楼2012-04-13 23:38:01

zhsteel

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看情况了,有时不超过10秒, 因为有些蛋白加热后就看不见了

只要方便虫子们就好，怎么帮助是次要的吧

7楼2012-04-16 01:22:12

yjchsh

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After your heating and quickly cool on ice for few minutes.
And then vortex to let your samples homogenous.
5000 rpm centrifuge 1min.

I think the heating will make some water in samples become vapor and stay on the lid and wall of the centrifuge tube.
The function of the centrifuge is to get the water back into your samples. So you don't loose anything.

Good luck with your experiments.

8楼2012-04-18 01:26:22