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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] SDS电泳的时候,样品上BUFF后煮沸3分钟变性,时间过长或过短有硬性要求吗?

加热后是否需要短暂离心,离心多久,作用是什么?

所有样品都一视同仁吗?
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yjchsh

铁杆木虫 (正式写手)

Dr.

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
After your heating and quickly cool on ice for few minutes.
And then vortex to let your samples homogenous.
5000 rpm centrifuge 1min.

I think the heating will make some water in samples become vapor and stay on the lid and wall of the centrifuge tube.
The function of the centrifuge is to get the water back into your samples. So you don't loose anything.

Good luck with your experiments.
8楼2012-04-18 01:26:22
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gaobingmiao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
seagrove: 金币+2, 鼓励新虫多多交流~ 2012-04-12 22:46:36
一般情况下煮5分钟就可以了 建议不要超过10分钟,时间太长蛋白煮化掉了,时间也不应少于3分钟,要不变性的不好,也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质,正常情况下可以不离心,有些时间比如直接拿菌液煮后还是最好离心一下 去掉不容的杂质!
2楼2012-04-12 21:48:17
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yjchsh

铁杆木虫 (正式写手)

Dr.

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaobingmiao at 2012-04-12 21:48:17:
一般情况下煮5分钟就可以了 建议不要超过10分钟,时间太长蛋白煮化掉了,时间也不应少于3分钟,要不变性的不好,也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质,正常情况下可以不离心,有些时间比如直接拿 ...

时间太长蛋白煮化掉了???
3楼2012-04-13 08:13:56
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s_cope

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意一楼的观点   嘿嘿
4楼2012-04-13 09:44:17
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