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汕头大学海洋科学接受调剂
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] SDS电泳的时候,样品上BUFF后煮沸3分钟变性,时间过长或过短有硬性要求吗?

加热后是否需要短暂离心,离心多久,作用是什么?

所有样品都一视同仁吗?
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yjchsh

铁杆木虫 (正式写手)

Dr.

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaobingmiao at 2012-04-12 21:48:17:
一般情况下煮5分钟就可以了 建议不要超过10分钟,时间太长蛋白煮化掉了,时间也不应少于3分钟,要不变性的不好,也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质,正常情况下可以不离心,有些时间比如直接拿 ...

时间太长蛋白煮化掉了???
3楼2012-04-13 08:13:56
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gaobingmiao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
seagrove: 金币+2, 鼓励新虫多多交流~ 2012-04-12 22:46:36
一般情况下煮5分钟就可以了 建议不要超过10分钟,时间太长蛋白煮化掉了,时间也不应少于3分钟,要不变性的不好,也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质,正常情况下可以不离心,有些时间比如直接拿菌液煮后还是最好离心一下 去掉不容的杂质!
2楼2012-04-12 21:48:17
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s_cope

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意一楼的观点   嘿嘿
4楼2012-04-13 09:44:17
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lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们实验室一般都是煮蛋白8分钟,然后12000rpm离心1分钟,抛出的条带很漂亮
我不管你看起看不起我,我都是个演员
5楼2012-04-13 21:44:09
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