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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电分析测试 » SDS电泳的时候，样品上BUFF后煮沸3分钟变性，时间过长或过短有硬性要求吗？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] SDS电泳的时候，样品上BUFF后煮沸3分钟变性，时间过长或过短有硬性要求吗？

加热后是否需要短暂离心，离心多久，作用是什么？

所有样品都一视同仁吗?
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1楼 2012-04-12 20:37:29
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lixingliang at 2012-04-13 21:44:09:
我们实验室一般都是煮蛋白8分钟，然后12000rpm离心1分钟，抛出的条带很漂亮

12000RPM是单纯的1分钟还是机器转速达到12000RPM之前的时间也计算？
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6楼2012-04-13 23:38:01
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gaobingmiao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
seagrove: 金币+2, 鼓励新虫多多交流~ 2012-04-12 22:46:36
一般情况下煮5分钟就可以了 建议不要超过10分钟，时间太长蛋白煮化掉了，时间也不应少于3分钟，要不变性的不好，也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质，正常情况下可以不离心，有些时间比如直接拿菌液煮后还是最好离心一下 去掉不容的杂质！
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2楼2012-04-12 21:48:17
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yjchsh

铁杆木虫 (正式写手)

Dr.
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaobingmiao at 2012-04-12 21:48:17:
一般情况下煮5分钟就可以了 建议不要超过10分钟，时间太长蛋白煮化掉了，时间也不应少于3分钟，要不变性的不好，也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质，正常情况下可以不离心，有些时间比如直接拿 ...

时间太长蛋白煮化掉了???
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3楼2012-04-13 08:13:56
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s_cope

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意一楼的观点   嘿嘿
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4楼2012-04-13 09:44:17
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