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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 做农杆菌转化的请进
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XLJ海阔天空

金虫 (小有名气)

[交流] 做农杆菌转化的请进

各位大侠好，关于抗生素浓度的筛选请教一下：

农杆菌侵染后，经过共培养一段时间后，需要将外植体转移到抑菌培养基上来抑制多余农杆菌的生长，需要对所加抗生素的浓度进行筛选。不知道各位大侠都是用的什么方法来筛选的？
看文献有的是用测OD值的方式来看不同浓度的抗生素的抑菌效果？你是用这种方法吗？这样可行吗？你具体是怎么操作的啊？
还有一种是外植体侵染共培养后，转到含不同浓度抗生素的培养基上来看其抑菌效果，自己感觉好像这个比前一个靠谱。
你使用的什么方法啊？希望和你交流一下，谢谢！
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1楼 2012-04-07 16:22:24
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XLJ海阔天空

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bbzj at 2012-04-09 10:57:13:
记得我当时是用农杆菌侵染后,在超净工作台上吹干,然后接种到含不同浓度梯度的培养基中进行筛选的.

那你在真正去做转化的时候也是这样让无菌风将其表面菌液吹干后就转到抑菌的培养i基上，不用无菌水什么的清洗外植体吗？不知道你转化的情况怎么样？
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8楼2012-04-09 16:29:37
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)
★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
这个不清楚
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2楼2012-04-07 20:00:39
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曾经遥远

银虫 (正式写手)
★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
我也想知道
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3楼2012-04-08 00:17:16
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wiln1

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流 2012-04-09 18:11:30
我觉得关键还是：共培养后的外植体清洗，多洗几次，要把农杆菌洗得尽可能干净。我以前第一次做的时候就是没洗干净不管加多少抗生素都不行，只是时间问题，浓度大了可能农杆菌就繁殖得慢点。第二次时我就多洗了几次，结果抗生素浓度低点也不长菌。
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4楼2012-04-08 07:29:24
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