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XLJ海阔天空

金虫 (小有名气)

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[交流] 做农杆菌转化的请进

各位大侠好，关于抗生素浓度的筛选请教一下：

农杆菌侵染后，经过共培养一段时间后，需要将外植体转移到抑菌培养基上来抑制多余农杆菌的生长，需要对所加抗生素的浓度进行筛选。不知道各位大侠都是用的什么方法来筛选的？
看文献有的是用测OD值的方式来看不同浓度的抗生素的抑菌效果？你是用这种方法吗？这样可行吗？你具体是怎么操作的啊？
还有一种是外植体侵染共培养后，转到含不同浓度抗生素的培养基上来看其抑菌效果，自己感觉好像这个比前一个靠谱。
你使用的什么方法啊？希望和你交流一下，谢谢！

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1楼 2012-04-07 16:22:24

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XLJ海阔天空

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by wiln1 at 2012-04-08 07:29:24:
我觉得关键还是：共培养后的外植体清洗，多洗几次，要把农杆菌洗得尽可能干净。我以前第一次做的时候就是没洗干净不管加多少抗生素都不行，只是时间问题，浓度大了可能农杆菌就繁殖得慢点。第二次时我就多洗了几次 ...

谢谢，感谢你的真诚交流。确实是这样的，洗的比较好的话，100mg/l 生长20d左右也不会污染