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做农杆菌转化的请进
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XLJ海阔天空
金虫
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虫号: 1048545
[交流]
做农杆菌转化的请进
各位大侠好,关于抗生素浓度的筛选请教一下:
农杆菌侵染后,经过共培养一段时间后,需要将外植体转移到抑菌培养基上来抑制多余农杆菌的生长,需要对所加抗生素的浓度进行筛选。不知道各位大侠都是用的什么方法来筛选的?
看文献有的是用测OD值的方式来看不同浓度的抗生素的抑菌效果?你是用这种方法吗?这样可行吗?你具体是怎么操作的啊?
还有一种是外植体侵染共培养后,转到含不同浓度抗生素的培养基上来看其抑菌效果,自己感觉好像这个比前一个靠谱。
你使用的什么方法啊?希望和你交流一下,谢谢!
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2012-04-07 16:22:24
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XLJ海阔天空
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4楼
:
Originally posted by
wiln1
at 2012-04-08 07:29:24:
我觉得关键还是:共培养后的外植体清洗,多洗几次,要把农杆菌洗得尽可能干净。我以前第一次做的时候就是没洗干净不管加多少抗生素都不行,只是时间问题,浓度大了可能农杆菌就繁殖得慢点。第二次时我就多洗了几次 ...
谢谢,感谢你的真诚交流。确实是这样的,洗的比较好的话,100mg/l 生长20d左右也不会污染
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6楼
2012-04-08 16:48:38
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★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
这个不清楚
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2楼
2012-04-07 20:00:39
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曾经遥远
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虫号: 1163781
★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
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3楼
2012-04-08 00:17:16
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wiln1
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帖子: 260
在线: 99.8小时
虫号: 1295822
★ ★ ★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流
2012-04-09 18:11:30
我觉得关键还是:共培养后的外植体清洗,多洗几次,要把农杆菌洗得尽可能干净。我以前第一次做的时候就是没洗干净不管加多少抗生素都不行,只是时间问题,浓度大了可能农杆菌就繁殖得慢点。第二次时我就多洗了几次,结果抗生素浓度低点也不长菌。
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4楼
2012-04-08 07:29:24
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