应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 昆虫触角总RNA提取疑问
51/1返回列表
查看: 4217  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

含羞草liu

新虫 (小有名气)

[求助] 昆虫触角总RNA提取疑问

我现在在提取蛾子触角的总RNA，采用的试剂是Trizol，提取后电泳检测，结果都是只有一条带，大概在900bp左右，已反复试验几次，得到的结果都是一样的，只有一条带900bp左右。电泳图见附图1.
为了验证我提取的产物是否为DNA，我同时提取了总DNA，电泳后发现有两条带，一条在2000bp以上，一条在在900bp左右。电泳图见附图2.
后来，我又用了柱式动物组织总RNA提取纯化试剂盒，按说明书的操作进行，最后提取的产物跑胶后也只有一条带，大小在2000bp以上，与总DNA电泳的上层条带大致位置相同。见图3.
根据得到的结果推测，两种RNA提取方法，可能只是提取出特定大小的基因组DNA。但我不明白，为什么按提RNA的方法只能提出DNA，还只有这特定的大小？RNA又在哪呢？
注：在提取的过程中，为了使裂解更充分，我用Trizol处理的时间为冰上静置半小时。为了使RNA沉淀更充分，我加异丙醇后，30℃温育30min。加氯仿后吸取的上清液是透明的，但异丙醇沉淀后就出现了黑色的杂质，看不到白色的RNA沉淀。
不明白是什么原因。 请有经验的帮忙分析一下，感激不尽！！！

图1



图2



图3
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力，奋斗，拼搏。。。
1楼 2012-03-29 21:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
含羞草liu: 金币+1, ★有帮助 2012-04-25 14:27:14
引用回帖:
4楼: Originally posted by 高飞12 at 2012-03-31 14:10:53:
我没有单独提取触角，但是经常提取小菜蛾幼虫的RNA，没有出现过以上现象，只是28s:18s差不多1:2。我个人认为你说“为了沉淀更充分，加异丙醇后，30℃温育30min”时间太久了吧，而且还是30°，我们实验室一般都是常 ...

非常同意！
加异丙醇沉淀一般是在冰上或者室温，30℃温度太高啦~首先是RNA容易降解，其次是不利于沉淀。30min有点久，一般5~10min就足够了。不过，最大的问题还是那个30℃！
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-02 11:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)
太诡异了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
我就是我
2楼2012-03-30 00:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
光看大小未必正确，可以试试用DNA酶消化，看看是不是DNA哦。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-03-30 02:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高飞12

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-04-02 11:30:02
含羞草liu: 金币+1 2012-04-25 14:26:24
我没有单独提取触角，但是经常提取小菜蛾幼虫的RNA，没有出现过以上现象，只是28s:18s差不多1:2。我个人认为你说“为了沉淀更充分，加异丙醇后，30℃温育30min”时间太久了吧，而且还是30°，我们实验室一般都是常温10min，RNA提取过程本来都要相对快速的，所以我觉得这步不大合理。个人意见~
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-31 14:10:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +7 羊腰板 2026-08-21 7/350 2026-08-21 21:28 by iwuli
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭