| 查看: 4221 | 回复: 12 | |||
[求助]
昆虫触角总RNA提取疑问
|
|||
|
我现在在提取蛾子触角的总RNA，采用的试剂是Trizol，提取后电泳检测，结果都是只有一条带，大概在900bp左右，已反复试验几次，得到的结果都是一样的，只有一条带900bp左右。电泳图见附图1. 为了验证我提取的产物是否为DNA，我同时提取了总DNA，电泳后发现有两条带，一条在2000bp以上，一条在在900bp左右。电泳图见附图2. 后来，我又用了柱式动物组织总RNA提取纯化试剂盒，按说明书的操作进行，最后提取的产物跑胶后也只有一条带，大小在2000bp以上，与总DNA电泳的上层条带大致位置相同。见图3. 根据得到的结果推测，两种RNA提取方法，可能只是提取出特定大小的基因组DNA。但我不明白，为什么按提RNA的方法只能提出DNA，还只有这特定的大小？RNA又在哪呢？ 注：在提取的过程中，为了使裂解更充分，我用Trizol处理的时间为冰上静置半小时。为了使RNA沉淀更充分，我加异丙醇后，30℃温育30min。加氯仿后吸取的上清液是透明的，但异丙醇沉淀后就出现了黑色的杂质，看不到白色的RNA沉淀。 不明白是什么原因。 请有经验的帮忙分析一下，感激不尽！！！  图1  图2  图3 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有154人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 总RNA提取完跑电泳步骤
已经有16人回复
- 大家看看我这个革兰氏阳性菌的总RNA提取电泳图是怎么回事
已经有5人回复
- RNA提取结果，帮忙分析下原因
已经有6人回复
- 关于昆虫蛋白质提取的问题
已经有29人回复
- 昆虫基因组提取
已经有3人回复
- 植物总RNA提取结果分析
已经有6人回复
- 动物组织DNA提取
已经有18人回复
- trizol 提RNA，DNA酶的问题
已经有7人回复
- 昆虫羽化的问题
已经有18人回复
- 提取动物组织RNA时的处理
已经有12人回复
- 脾脏总RNA提取及RT-PCR
已经有4人回复
- 海篷子RNA提取
已经有5人回复
- 氢氧化镍超级电容器充放电中疑问
已经有8人回复
- [下载工具][冰点文库下载器][突破限制免费下载百度、豆丁等多种文库文档]【转载】
已经有14人回复
- 分层计算和公式E oniom= E high(model) +E low(real)-E low(model)之间关系的疑问
已经有4人回复
- 正交试验优化提取工艺，L9（34）九个实验的测定的含量相差比较大，正常吗？
已经有5人回复
- 提完RNA的研钵，黑乎乎的，怎么清洗？
已经有17人回复
- 用来沉淀RNA的75％乙醇的DEPC水是用哪种方法配制的？
已经有21人回复
- 关于制备固体超强酸SO42-/TiO2的一点疑问
已经有21人回复
- 【求助】黄芪根据药典提取后蒸干后搁置10天再用甲醇溶时有白色粉末出现不溶于甲醇怎
已经有6人回复
- 【求助/交流】提总的RNA的试剂是RNAiso效果好还是Trizol效果好
已经有31人回复
- 【求助】从北京到东京转机到亚特兰大 需要重新取行李吗
已经有5人回复
- 【求助】目前，浙大或者中国农科院昆虫专业的全日制博士研究生各方面待遇如何？
已经有18人回复
- 【求助】为什么提取叶绿素时干材料一定要用95%的乙醇，而新鲜的材料可以用无水乙醇提?
已经有14人回复
- 【求助/交流】关于RNA提取后DNaseⅠ的处理
已经有11人回复
- 【求助】怎么样提取生物碱,给你20金子
已经有15人回复
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
3楼2012-03-30 02:31:01
wtyyyyy1988
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 6399
- 散金: 490
- 红花: 2
- 帖子: 697
- 在线: 153.6小时
- 虫号: 1196990
- 注册: 2011-01-27
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
2楼2012-03-30 00:49:01
4楼2012-03-31 14:10:53
5楼2012-03-31 17:27:24
浮云翩跹
金虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1946.4
- 红花: 1
- 帖子: 1488
- 在线: 164.2小时
- 虫号: 987371
- 注册: 2010-04-01
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
，不必看提取的RNA分子量的，没有意义。实际上表明上也是为了看提取的28S和18S的情况，来估计总RNA的情况。楼主的情况不于重复提取，应该仔细思考每个提取过程，从材料收集、保存、研磨是否充分等等，最重要的是预防RNA酶，这个最重要了。祝实验找到问题所在，加油！ 6楼2012-04-01 20:31:53
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
7楼2012-04-02 11:32:37
8楼2012-05-04 13:00:02
qiuzhileipo
木虫 (正式写手)
生如夏花
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2285.2
- 散金: 38
- 红花: 3
- 帖子: 381
- 在线: 184.4小时
- 虫号: 1617061
- 注册: 2012-02-14
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
9楼2012-09-04 09:54:58
10楼2013-04-13 21:48:11
40