24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3794  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

含羞草liu

新虫 (小有名气)

[求助] 昆虫触角总RNA提取疑问

我现在在提取蛾子触角的总RNA,采用的试剂是Trizol,提取后电泳检测,结果都是只有一条带,大概在900bp左右,已反复试验几次,得到的结果都是一样的,只有一条带900bp左右。电泳图见附图1.
为了验证我提取的产物是否为DNA,我同时提取了总DNA,电泳后发现有两条带,一条在2000bp以上,一条在在900bp左右。电泳图见附图2.
后来,我又用了柱式动物组织总RNA提取纯化试剂盒,按说明书的操作进行,最后提取的产物跑胶后也只有一条带,大小在2000bp以上,与总DNA电泳的上层条带大致位置相同。见图3.
根据得到的结果推测,两种RNA提取方法,可能只是提取出特定大小的基因组DNA。但我不明白,为什么按提RNA的方法只能提出DNA,还只有这特定的大小?RNA又在哪呢?
注:在提取的过程中,为了使裂解更充分,我用Trizol处理的时间为冰上静置半小时。为了使RNA沉淀更充分,我加异丙醇后,30℃温育30min。加氯仿后吸取的上清液是透明的,但异丙醇沉淀后就出现了黑色的杂质,看不到白色的RNA沉淀。
不明白是什么原因。 请有经验的帮忙分析一下,感激不尽!!!

图1



图2



图3
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

努力,奋斗,拼搏。。。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高飞12

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流! 2012-04-02 11:30:02
含羞草liu: 金币+1 2012-04-25 14:26:24
我没有单独提取触角,但是经常提取小菜蛾幼虫的RNA,没有出现过以上现象,只是28s:18s差不多1:2。我个人认为你说“为了沉淀更充分,加异丙醇后,30℃温育30min”时间太久了吧,而且还是30°,我们实验室一般都是常温10min,RNA提取过程本来都要相对快速的,所以我觉得这步不大合理。个人意见~
4楼2012-03-31 14:10:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

太诡异了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我就是我
2楼2012-03-30 00:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
光看大小未必正确,可以试试用DNA酶消化,看看是不是DNA哦。
3楼2012-03-30 02:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

装子516

铁虫 (初入文坛)


我也来学习学习!
5楼2012-03-31 17:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +19 好好休息好不好 2026-04-09 22/1100 2026-04-10 11:01 by luosha500
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 生物与医药273求调剂 +18 荔题南墙 2026-04-05 19/950 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 一志愿2110,化学学硕310分,本科重点双非求调剂 +18 努力奋斗112 2026-04-08 18/900 2026-04-09 23:28 by wolf97
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 283分求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 14/700 2026-04-08 07:03 by lijunpoly
[考研] 0854电子信息319求调剂(接受跨专业调剂) +5 星星不眨眼喽 2026-04-05 6/300 2026-04-07 22:16 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 生物调剂 +5 橙子橙子橙子啊 2026-04-05 9/450 2026-04-07 15:31 by 上岸快快
[考研] 工科 22408 267求推荐 +4 wanwan00 2026-04-05 5/250 2026-04-06 22:47 by chenzhimin
[考研] 338求调剂 +4 我想上岸ii 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:04 by 木子君1218
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:06 by imissbao
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
信息提示
请填处理意见