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狼在身边

木虫 (小有名气)

[求助] 关于RT-PCR的众多细节

我提取的是细菌的RNA,浓度在500ng/ul左右,但纯度很低,260/280只在1.6-1.7之间,请问这样的RNA能用吗,感觉细菌的RNA的260/280好像都很低,没有组织和植物的RNA那么好。用这样的RNA反转录之后的荧光PCR效果也不错,现在就很纠结,这种RNA纯度能用吗,请问大家提取的细菌RNA纯度都咋样,我提取RNA的试剂是TAKARA的。
   再有一个现象,提取RNA过程中添加异丙醇离心后没有RNA沉淀,后续乙醇洗脱时心里很虚。请问大家遇到过这样的问题吗?
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
RNA微量,所以即使看不到沉淀,但是在乙醇洗涤的时候会看见的。我也有心虚的时候,但是在洗涤的时候总是能看见RNA所以现在也就不心虚了
3楼2012-03-28 14:45:29
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