24小时热门版块排行榜    

查看: 5425  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lintaosong

木虫 (正式写手)

[求助] NcoⅠ酶切位点的设计问题

各位大虾:
我的基因开头序列为ATGTATT....我想在开头加上用NcoI(CCATGG)酶切位点,但我起始密码子后的密码子是TAT,我还想用NcoⅠ酶切位点的话,我应该怎么设计,谢谢!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by lintaosong at 2012-03-27 12:23:50:
第一种方法的话,对蛋白的影响大不?

一般情况影响不大,N/C端的氨基酸序列一般不在活性中心。
5楼2012-03-27 13:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核, 学习了 2012-03-27 11:31:57
lintaosong: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2012-03-27 14:31:28
不管怎么改,ATG后面都不是TAT,也就是第二个氨基酸不是酪氨酸。其实也不用太纠结,一种方法直接把TAT改成GGC好了,这样第二个氨基酸变为甘氨酸,第三个氨基酸及后面的都不变;第二种方法是在ATG后面加三个碱基(GNN),后面是TAT,这样表达出来就是第二位多了一个氨基酸。
2楼2012-03-27 07:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
CCATGG后面补上两个碱基保持GNN,这样你的基因就不会移码,NN选择和载体上NcoI后面的碱基一致,然后紧跟你的基因TATT,最终会多一个氨基酸,一般没什么影响。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-03-27 10:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lintaosong

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-27 07:52:40:
不管怎么改,ATG后面都不是TAT,也就是第二个氨基酸不是酪氨酸。其实也不用太纠结,一种方法直接把TAT改成GGC好了,这样第二个氨基酸变为甘氨酸,第三个氨基酸及后面的都不变;第二种方法是在ATG后面加三个碱基( ...

第一种方法的话,对蛋白的影响大不?
4楼2012-03-27 12:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +8 ziyangfang 2026-08-25 11/550 2026-09-01 09:51 by zzuzxg
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见