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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞菜鸟问一个很菜的问题。。。
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古韵清音

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞菜鸟问一个很菜的问题。。。

最近用培养皿养细胞。。。发现细胞都在一个区域聚集得很厉害，而其他地方都稀稀拉拉的，问要如何使细胞分散均匀？我是2ml细胞加到8ml培养基内，然后拿去看显微镜，之后放入培养箱横着摇10次再竖着摇10次。还有，现在这个状况应该怎么办？密集区估计一贴壁就长满了，而稀少区还很稀。。。
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1楼 2012-03-24 21:13:18
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
那就是摇的不好，要是摇最后那下要突然停在中间。放进去不要老看，等第二天再看，中间也不要碰他
这是经验活，多铺铺，浪费浪费就好了，没好办法。
另外细胞一定要消化好，不知道你用什么细胞？我铺293T就消化的较开，那个细胞易居团，所以必须消化好
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-03-24 21:25:55
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
古韵清音: 金币+5, ★★★很有帮助, 恩~谢谢。那位版主没有点应助回帖，金币就给你吧~~ 2012-03-26 09:54:17
7721确实比较少养，你在细胞加入到瓶中后，将瓶平放，然后左右前后轻轻晃动，像画十字一样，千万不要把培养基晃到瓶盖上。我养了293；7402；HEPG2等细胞这样摇都长得挺均匀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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我就是我
6楼2012-03-25 01:24:52
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-05 18:26:44
贴牢的，说明细胞不错
还没贴好的，PBs洗洗去掉好了，有人这样做来挑状态好的细胞。当然不能刚贴完就立即消化，是会对细胞不好。但第二天还有贴的不好的，就可以洗掉，留好的，如果有比较密的那就消化重铺，如不密，就让他再涨涨
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
8楼2012-03-25 14:10:38
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xingnian0925

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流~欢迎常来哈~ 2012-04-05 18:26:31
曾经也遇到过这种问题，摇平皿的时候，不要让液体形成漩涡，快速前后左右摇动，放入培养箱后尽量不要频繁移动。多练习几次就好了。
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与未知的相遇，七分欢喜三分孤寂
10楼2012-03-26 09:24:07
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motiziki

铜虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-05 18:27:05
6孔板的话，接种的时候可以把细胞悬液混匀，加入到板里的时候分散加入，我是画一个圆圈在板里，吹打一下，加好了摇一下，用摇板机不行，得用手摇，前后，左右，十字形摇晃几次就可以了

放到培养箱里面了就不要动了，也不要频繁拿出来看，12h以上，可以去看看贴壁了没
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已经搞不清楚是我在玩细胞还是细胞在玩我了
11楼2012-04-05 09:39:27
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普通回帖

古韵清音

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-24 21:25:55:
那就是摇的不好，要是摇最后那下要突然停在中间。放进去不要老看，等第二天再看，中间也不要碰他
这是经验活，多铺铺，浪费浪费就好了，没好办法。
另外细胞一定要消化好，不知道你用什么细胞？我铺293T就消化的 ...

我养的肝癌7721，我吹打是吹打好了的，都成单个，就是估计摇得不够。。。我头疼的是现在怎么处理，。。。密的地方差不多等一贴壁就满了，稀的地方么还很稀。。。
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3楼2012-03-24 21:28:06
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
消化了，重新再铺进去，要不换新皿铺，这个就是手法的事，还真不好解决

要不换吹的，细胞加进去，就用枪或管子使劲吹打几次
或先加个培养基润润底，再加细胞进去
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
4楼2012-03-24 21:33:37
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古韵清音

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 古韵清音 at 2012-03-24 21:28:06:
我养的肝癌7721，我吹打是吹打好了的，都成单个，就是估计摇得不够。。。我头疼的是现在怎么处理，。。。密的地方差不多等一贴壁就满了，稀的地方么还很稀。。。

今儿中午才传的代，这才贴上去，细胞都还是圆的，现在又消化，会不会对细胞损伤很大？我的细胞是另外一个实验室好不容易要来的。。。可金贵了T_T
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5楼2012-03-24 21:37:09
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古韵清音

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 古韵清音 at 2012-03-24 21:37:09:
今儿中午才传的代，这才贴上去，细胞都还是圆的，现在又消化，会不会对细胞损伤很大？我的细胞是另外一个实验室好不容易要来的。。。可金贵了T_T

恩，我头疼的是现在怎么办。。。今天去看了，有些贴牢了，有些贴在壁上但是还是圆圆的，我想今天再消化原瓶传会不会对细胞有很大损伤
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7楼2012-03-25 13:09:05
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decloud

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还有个简单的方法，在试管里混合好，再加阿，，，
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适则存乙，劳则忙乙，
9楼2012-03-26 04:53:04
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