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古韵清音

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞菜鸟问一个很菜的问题。。。

最近用培养皿养细胞。。。发现细胞都在一个区域聚集得很厉害,而其他地方都稀稀拉拉的,问要如何使细胞分散均匀?我是2ml细胞加到8ml培养基内,然后拿去看显微镜,之后放入培养箱横着摇10次再竖着摇10次。还有,现在这个状况应该怎么办?密集区估计一贴壁就长满了,而稀少区还很稀。。。
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

那就是摇的不好,要是摇最后那下要突然停在中间。放进去不要老看,等第二天再看,中间也不要碰他
这是经验活,多铺铺,浪费浪费就好了,没好办法。
另外细胞一定要消化好,不知道你用什么细胞?我铺293T就消化的较开,那个细胞易居团,所以必须消化好
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-03-24 21:25:55
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
古韵清音: 金币+5, ★★★很有帮助, 恩~谢谢。那位版主没有点应助回帖,金币就给你吧~~ 2012-03-26 09:54:17
7721确实比较少养,你在细胞加入到瓶中后,将瓶平放,然后左右前后轻轻晃动,像画十字一样,千万不要把培养基晃到瓶盖上。我养了293;7402;HEPG2等细胞这样摇都长得挺均匀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我就是我
6楼2012-03-25 01:24:52
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-05 18:26:44
贴牢的,说明细胞不错
还没贴好的,PBs洗洗去掉好了,有人这样做来挑状态好的细胞。当然不能刚贴完就立即消化,是会对细胞不好。但第二天还有贴的不好的,就可以洗掉,留好的,如果有比较密的那就消化重铺,如不密,就让他再涨涨
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
8楼2012-03-25 14:10:38
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xingnian0925

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流~欢迎常来哈~ 2012-04-05 18:26:31
曾经也遇到过这种问题,摇平皿的时候,不要让液体形成漩涡,快速前后左右摇动,放入培养箱后尽量不要频繁移动。多练习几次就好了。
与未知的相遇,七分欢喜三分孤寂
10楼2012-03-26 09:24:07
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motiziki

铜虫 (初入文坛)

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-05 18:27:05
6孔板的话,接种的时候可以把细胞悬液混匀,加入到板里的时候分散加入,我是画一个圆圈在板里,吹打一下,加好了摇一下,用摇板机不行,得用手摇,前后,左右,十字形摇晃几次就可以了

放到培养箱里面了就不要动了,也不要频繁拿出来看,12h以上,可以去看看贴壁了没
已经搞不清楚是我在玩细胞还是细胞在玩我了
11楼2012-04-05 09:39:27
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普通回帖

古韵清音

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-24 21:25:55:
那就是摇的不好,要是摇最后那下要突然停在中间。放进去不要老看,等第二天再看,中间也不要碰他
这是经验活,多铺铺,浪费浪费就好了,没好办法。
另外细胞一定要消化好,不知道你用什么细胞?我铺293T就消化的 ...

我养的肝癌7721,我吹打是吹打好了的,都成单个,就是估计摇得不够。。。我头疼的是现在怎么处理,。。。密的地方差不多等一贴壁就满了,稀的地方么还很稀。。。
3楼2012-03-24 21:28:06
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

消化了,重新再铺进去,要不换新皿铺,这个就是手法的事,还真不好解决

要不换吹的,细胞加进去,就用枪或管子使劲吹打几次
或先加个培养基润润底,再加细胞进去
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
4楼2012-03-24 21:33:37
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古韵清音

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 古韵清音 at 2012-03-24 21:28:06:
我养的肝癌7721,我吹打是吹打好了的,都成单个,就是估计摇得不够。。。我头疼的是现在怎么处理,。。。密的地方差不多等一贴壁就满了,稀的地方么还很稀。。。

今儿中午才传的代,这才贴上去,细胞都还是圆的,现在又消化,会不会对细胞损伤很大?我的细胞是另外一个实验室好不容易要来的。。。可金贵了T_T
5楼2012-03-24 21:37:09
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古韵清音

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 古韵清音 at 2012-03-24 21:37:09:
今儿中午才传的代,这才贴上去,细胞都还是圆的,现在又消化,会不会对细胞损伤很大?我的细胞是另外一个实验室好不容易要来的。。。可金贵了T_T

恩,我头疼的是现在怎么办。。。今天去看了,有些贴牢了,有些贴在壁上但是还是圆圆的,我想今天再消化原瓶传会不会对细胞有很大损伤
7楼2012-03-25 13:09:05
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decloud

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还有个简单的方法,在试管里混合好,再加阿,,,
适则存乙,劳则忙乙,
9楼2012-03-26 04:53:04
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