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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞菜鸟问一个很菜的问题。。。
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古韵清音

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞菜鸟问一个很菜的问题。。。

最近用培养皿养细胞。。。发现细胞都在一个区域聚集得很厉害，而其他地方都稀稀拉拉的，问要如何使细胞分散均匀？我是2ml细胞加到8ml培养基内，然后拿去看显微镜，之后放入培养箱横着摇10次再竖着摇10次。还有，现在这个状况应该怎么办？密集区估计一贴壁就长满了，而稀少区还很稀。。。
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1楼 2012-03-24 21:13:18
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motiziki

铜虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-05 18:27:05
6孔板的话，接种的时候可以把细胞悬液混匀，加入到板里的时候分散加入，我是画一个圆圈在板里，吹打一下，加好了摇一下，用摇板机不行，得用手摇，前后，左右，十字形摇晃几次就可以了

放到培养箱里面了就不要动了，也不要频繁拿出来看，12h以上，可以去看看贴壁了没
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已经搞不清楚是我在玩细胞还是细胞在玩我了
11楼2012-04-05 09:39:27
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
那就是摇的不好，要是摇最后那下要突然停在中间。放进去不要老看，等第二天再看，中间也不要碰他
这是经验活，多铺铺，浪费浪费就好了，没好办法。
另外细胞一定要消化好，不知道你用什么细胞？我铺293T就消化的较开，那个细胞易居团，所以必须消化好
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-03-24 21:25:55
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古韵清音

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-24 21:25:55:
那就是摇的不好，要是摇最后那下要突然停在中间。放进去不要老看，等第二天再看，中间也不要碰他
这是经验活，多铺铺，浪费浪费就好了，没好办法。
另外细胞一定要消化好，不知道你用什么细胞？我铺293T就消化的 ...

我养的肝癌7721，我吹打是吹打好了的，都成单个，就是估计摇得不够。。。我头疼的是现在怎么处理，。。。密的地方差不多等一贴壁就满了，稀的地方么还很稀。。。
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3楼2012-03-24 21:28:06
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
消化了，重新再铺进去，要不换新皿铺，这个就是手法的事，还真不好解决

要不换吹的，细胞加进去，就用枪或管子使劲吹打几次
或先加个培养基润润底，再加细胞进去
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
4楼2012-03-24 21:33:37
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