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805085868

兑换贵宾

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[交流] PCR条带为什么会出现引物二聚体呀？目的条带没有出现。新手不大懂~~~

PCR条带为什么会出现引物二聚体呀？目的条带没有出现。
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1楼 2012-03-21 22:59:11
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rommel1941

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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805085868(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-03-22 13:35:44
内容已删除
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2楼2012-03-21 23:51:27
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imyting

兑换贵宾

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★
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楼上正解，不过觉得Mg2+浓度应该不是问题，如果二聚体情况严重，你可能就要重新设计引物了……
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3楼2012-03-22 09:44:52
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hejp03

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
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1. 退火温度太低
2. 引物浓度太高
3. 模板浓度低
4. 引物设计不合适
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4楼2012-03-22 14:23:37
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倔强的投手

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
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这个很正常的
优化反应体系和PCR反应条件
实在不行就换引物
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5楼2012-03-22 14:48:37
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mdtdtao

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
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先确定引物设计的合不合适。目的条带不出现，退火温度过高或过低，加大模板浓度，实在不行，换引物
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6楼2012-03-22 15:15:50
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zjcgss

版主

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引物二聚体是你的引物互补到一起了，很可能是退火温度太高导致引物不能和模板有效结合，或者是引物设计的不好。做个退火温度的梯度看看。
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7楼2012-03-22 16:08:35
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zcc3255

兑换贵宾

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★
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引物二聚体多的话，引物浓度可以再降低
没有目的条带，引物特异性不强吧
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8楼2012-03-22 16:35:13
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Apeterson

兑换贵宾

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一楼的是正解，应该是温度有问题，在可能是引物不对，PCR出现二聚体是正常的。
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9楼2012-03-22 22:14:48
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牙丫丫

兑换贵宾

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因为你的上下引物自身或者之间的碱基会相互配对，产生二聚体，最好重新设计引物，或者减数引物的量，增加模板量。
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10楼2014-11-12 17:18:41
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