应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手求助：关于提质粒
161/1返回列表
查看: 2713  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wohenaini

木虫 (小有名气)

[交流] 新手求助：关于提质粒

提的质粒跑出来的条带总是有拖尾，而且看不出所谓的超螺旋和其他构型的条带

我们四五个人一起当作练习做的 ，结果都是这样。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-03-19 10:20:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2012-03-19 10:33:17
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

wohenaini

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 198903133397 at 2012-03-19 10:33:17:
怎么感觉你的胶放在冰箱里面冻过

没有啊 跑好了就去照相的，
冰箱冻过会有什么反应啊？
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-19 10:47:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ken126

新虫 (小有名气)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
有没有检查过TAE buffer?
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-19 10:47:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wohenaini

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 10:47:46:
有没有检查过TAE buffer?

没有用TAE啊，都是用的Tris-HCl的buffer。
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-19 10:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ken126

新虫 (小有名气)
★
wohenaini: 金币+1 2012-03-19 11:23:46
是否跑胶是电压过高？buffer使用时间过长？
你们的胶为什么会有划痕状痕迹？
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-19 10:59:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wohenaini

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 10:59:34:
是否跑胶是电压过高？buffer使用时间过长？
你们的胶为什么会有划痕状痕迹？

划痕应该是下面铺的保鲜膜。
电压是120v，buffer用的时间不长啊，用的久了会有什么影响啊？
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-19 11:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
并不是每次提都会出现两条或三条带的。提取的时候不要震荡得太厉害。试下把点样的量减少，或稀释一下再跑胶，看看条带会不会好一点？
赞一下 回复此楼
8楼2012-03-19 13:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dinghonglan

新虫 (初入文坛)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
好像有蛋白质或基因组污染，提取过程去除蛋白和基因组注意一下，另外上样量太大，可以减少上样量，电泳时间缩短一些试试
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-19 14:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx6291

铜虫 (小有名气)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
用新鲜的胶再重新跑吧，应该是胶时间长了
赞一下 回复此楼
10楼2012-03-19 15:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hardmoon

新虫 (初入文坛)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
首先跑电泳时间要缩短，你的Marker跑得也很长。其次，加完溶液I要混合均匀，但加完裂解液和溶液3都不要剧烈震荡，否则会有RNA污染，基因组也很难复性，建议你找一些体质粒的SOP看看，或者参考一些试剂盒说明书。
赞一下 回复此楼
11楼2012-03-19 15:05:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

枫叶落不落

金虫 (正式写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
电泳缓冲液重新配一下
胶重新配一下
上样量可以适当减少
赞一下 回复此楼
12楼2012-03-19 17:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajiong

金虫 (正式写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
电泳加样加了多少微升啊？
赞一下 回复此楼
13楼2012-03-19 23:48:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-03-21 19:01:37
应该是有基因组或者蛋白污染，孔里面都还有亮的物质加脱尾那部分。提质粒的时候特别是碱裂解过程不要太剧烈，一般用试剂盒提出来的质粒比较浓，质粒3微升足以，新配一次电极缓冲液试试吧。电泳电压根据你实际条带的大小来调整吧，条带大电压可适当调大点，节约时间，
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-20 14:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猫迷迷糊

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看是不是加试剂时间过长呀？
赞一下 回复此楼
15楼2012-03-21 14:34:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter227

新虫 (初入文坛)
有时跑出来是这样的啊
赞一下 回复此楼
16楼2012-03-21 16:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wohenaini 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-16 19:27 by rRvxEj3zorCy
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 19:15 by rRvxEj3zorCy
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 11/550 2026-09-16 18:37 by rRvxEj3zorCy
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-16 18:36 by rRvxEj3zorCy
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-16 18:00 by i3KBRD19ERkG
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 17:12 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 14:27 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 08:51 by SjQobnC04j06
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:11 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:27 by DgNGHc3h5tPl
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:35 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:39 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭