应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手求助：关于提质粒
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
161/1返回列表
查看: 2292  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wohenaini

木虫 (小有名气)

[交流] 新手求助：关于提质粒

提的质粒跑出来的条带总是有拖尾，而且看不出所谓的超螺旋和其他构型的条带

我们四五个人一起当作练习做的 ，结果都是这样。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-03-19 10:20:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2012-03-19 10:33:17
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

wohenaini

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 198903133397 at 2012-03-19 10:33:17:
怎么感觉你的胶放在冰箱里面冻过

没有啊 跑好了就去照相的，
冰箱冻过会有什么反应啊？
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-19 10:47:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ken126

新虫 (小有名气)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
有没有检查过TAE buffer?
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-19 10:47:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wohenaini

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 10:47:46:
有没有检查过TAE buffer?

没有用TAE啊，都是用的Tris-HCl的buffer。
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-19 10:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ken126

新虫 (小有名气)
★
wohenaini: 金币+1 2012-03-19 11:23:46
是否跑胶是电压过高？buffer使用时间过长？
你们的胶为什么会有划痕状痕迹？
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-19 10:59:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wohenaini

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 10:59:34:
是否跑胶是电压过高？buffer使用时间过长？
你们的胶为什么会有划痕状痕迹？

划痕应该是下面铺的保鲜膜。
电压是120v，buffer用的时间不长啊，用的久了会有什么影响啊？
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-19 11:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
并不是每次提都会出现两条或三条带的。提取的时候不要震荡得太厉害。试下把点样的量减少，或稀释一下再跑胶，看看条带会不会好一点？
赞一下 回复此楼
8楼2012-03-19 13:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dinghonglan

新虫 (初入文坛)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
好像有蛋白质或基因组污染，提取过程去除蛋白和基因组注意一下，另外上样量太大，可以减少上样量，电泳时间缩短一些试试
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-19 14:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx6291

铜虫 (小有名气)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
用新鲜的胶再重新跑吧，应该是胶时间长了
赞一下 回复此楼
10楼2012-03-19 15:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hardmoon

新虫 (初入文坛)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
首先跑电泳时间要缩短，你的Marker跑得也很长。其次，加完溶液I要混合均匀，但加完裂解液和溶液3都不要剧烈震荡，否则会有RNA污染，基因组也很难复性，建议你找一些体质粒的SOP看看，或者参考一些试剂盒说明书。
赞一下 回复此楼
11楼2012-03-19 15:05:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

枫叶落不落

金虫 (正式写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
电泳缓冲液重新配一下
胶重新配一下
上样量可以适当减少
赞一下 回复此楼
12楼2012-03-19 17:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajiong

金虫 (正式写手)
★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
电泳加样加了多少微升啊？
赞一下 回复此楼
13楼2012-03-19 23:48:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
wohenaini(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-03-21 19:01:37
应该是有基因组或者蛋白污染，孔里面都还有亮的物质加脱尾那部分。提质粒的时候特别是碱裂解过程不要太剧烈，一般用试剂盒提出来的质粒比较浓，质粒3微升足以，新配一次电极缓冲液试试吧。电泳电压根据你实际条带的大小来调整吧，条带大电压可适当调大点，节约时间，
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-20 14:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猫迷迷糊

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看是不是加试剂时间过长呀？
赞一下 回复此楼
15楼2012-03-21 14:34:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter227

新虫 (初入文坛)
有时跑出来是这样的啊
赞一下 回复此楼
16楼2012-03-21 16:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wohenaini 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +11 倘若起风了呢 2026-04-05 11/550 2026-04-05 23:21 by 来看流星雨10
[考研] 复试调剂 +13 呼呼？~+123456 2026-04-05 13/650 2026-04-05 22:07 by 醉翁wl
[考研] 生物工程求调剂 +6 喜欢还是不甘心 2026-04-05 6/300 2026-04-05 10:28 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +3 小沢 2026-04-03 3/150 2026-04-05 09:10 by sihailian3
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +11 努力奋斗112 2026-04-04 11/550 2026-04-04 20:51 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +39 洛神哥哥 2026-03-31 41/2050 2026-04-03 21:51 by qlm5820
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂！！！ +8 贝呗钡钡 2026-03-30 8/400 2026-04-03 09:41 by hypershenger
[考研] 326求调剂 +10 崽崽仔 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:08 by 帕尔马拉特
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +20 Youth_ 2026-03-30 20/1000 2026-04-02 14:48 by 5896
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 一志愿9初试366 本双非求调剂 +4 运气来得若有似� 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:56 by guanxin1001
[考研] 化学工程专硕324分，一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
[考研] 生物学327，求调剂 +5 书上的梅子 2026-04-01 6/300 2026-04-02 06:47 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿西安交大材料学硕（英一数二）347，求调剂到高分子/材料相关专业 +7 zju51 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:35 by CFQZAFU
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:35 by wangjy2002
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭