应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问农杆菌EHA105有链霉素抗性吗？
101/1返回列表
查看: 4953  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

XOooZzz

银虫 (小有名气)

[交流] 请问农杆菌EHA105有链霉素抗性吗？ 已有3人参与

如题。网上看了些资料说是这个菌株只抗利福平，但身边也有人说抗链霉素的。马上要做实验了，十分的不踏实呢....
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-03-17 22:56:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有条件的话自己试试看嘛。好像之前有人讨论过这个，楼主搜索下帖子吧。
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-18 17:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XOooZzz

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-03-18 17:31:30:
有条件的话自己试试看嘛。好像之前有人讨论过这个，楼主搜索下帖子吧。

本来就是要靠这个特性来判断手头上的菌种是不是这个菌株的....
已经看过前人的讨论了，有的人说有，有的人说没有，搞得我都晕了，然后才发这个贴的...

刚看到原作者对这个问题的回复了：
     It is true that EHA105 should have only rif-resistance (on the
chromosome).  However, when I made the strain, I used pPH1JI as an
eviction plasmid to do the double homologous recombination.  pPH1JI
encodes spec resistance.  We have a version of the strain that has
lost pPH1JI and is spec-sensitive.
     Sincerely,
     Stan

这么说是只有利福平抗性了？
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-18 18:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-03-18 18:06:34:
本来就是要靠这个特性来判断手头上的菌种是不是这个菌株的....
已经看过前人的讨论了，有的人说有，有的人说没有，搞得我都晕了，然后才发这个贴的...

刚看到原作者对这个问题的回复了：
     It is true t ...

……这个回复就纠结了。
作者说，本来呢，EHA105这东西，应该是只有Rif抗性的（染色体编码）。但是在做这菌株的时候使用了pPH1JI 这个驱逐质粒，pPH1JI 本身编码Spec抗性基因。所以：如果你的菌株不含pPH1JI 质粒，那么它就只有Rif抗性；如果含pPH1JI 质粒，那么就同时带Rif抗性和Spec抗性。
你可以检测下你的菌株含不含这个质粒就知道了。
另外，作者最后说，他们有确定不含pPH1JI质粒（不带Spec抗性）的EHA105，你也可以考虑问他要这个。
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-18 18:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XOooZzz

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-03-18 18:24:01:
……这个回复就纠结了。
作者说，本来呢，EHA105这东西，应该是只有Rif抗性的（染色体编码）。但是在做这菌株的时候使用了pPH1JI 这个驱逐质粒，pPH1JI 本身编码Spec抗性基因。所以：如果你的菌株不含pPH1JI 质 ...

哦，真多谢你翻译了一下呢，不然我真看得半懂不懂...
也就是说，Spec/Strep抗性不能作为EHA105的特征，而且该抗性基因也与辅助质粒无关咯。（？）实验室以前都用Strep养EHA105呢，看来以后是没有必要再加这个抗生素了。
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-18 23:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-03-18 23:23:20:
哦，真多谢你翻译了一下呢，不然我真看得半懂不懂...
也就是说，Spec/Strep抗性不能作为EHA105的特征，而且该抗性基因也与辅助质粒无关咯。（？）实验室以前都用Strep养EHA105呢，看来以后是没有必要再加这个抗 ...

嗯，Spec抗性不能作为特征。pPH1JI 质粒会慢慢丢掉，所以会出现有的克隆有Sepc抗性，有的没有，用起来很悬。最好单独筛选下不含Spec抗性的EHA105，后续就不要再加Spec了。

[ Last edited by 西瓜 on 2012-3-19 at 09:09 ]
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-19 09:08:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XOooZzz

银虫 (小有名气)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励反馈！ 2012-03-20 15:43:37
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-03-18 17:31:30:
有条件的话自己试试看嘛。好像之前有人讨论过这个，楼主搜索下帖子吧。

试验的结果出来了，也许已经没什么意义了，也发上来吧。
前两天拿自己实验室的菌种和别的实验室的菌种做了一下试验，自己的菌种是一直加strep 50mg/L和rif养的，借来的菌种一直只加rif。各取4个单菌落划到strep浓度梯度平板。培养约40h。
结果是，自己实验室的能耐75mg/L或者以上的strep
借来的只能耐受最高50mg/L的strep

看来我们这两个实验室的菌株都带pPH1JI质粒。
现在不纠结这个问题了，很感谢西瓜版热心的回复呢
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-20 15:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

king-long

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-03-20 15:21:55
试验的结果出来了，也许已经没什么意义了，也发上来吧。
前两天拿自己实验室的菌种和别的实验室的菌种做了一下试验，自己的菌种是一直加strep 50mg/L和rif养的，借来的菌种一直只加rif。各取4个单菌落划到strep浓 ...

spec不是壮观霉素抗性吗？step不是链霉素抗性吗？原作者说pPH1JI质粒带有spec抗性，你用链霉素筛选能说明含不含这个质粒？？
赞一下 回复此楼
8楼2015-01-25 23:56:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

king-long

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
EHA105说明下，染色体有利福平抗性，驱使质粒pEHA105含有链霉素抗性。
赞一下 回复此楼
9楼2015-01-26 00:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-03-20 15:21:55
试验的结果出来了，也许已经没什么意义了，也发上来吧。
前两天拿自己实验室的菌种和别的实验室的菌种做了一下试验，自己的菌种是一直加strep 50mg/L和rif养的，借来的菌种一直只加rif。各取4个单菌落划到strep浓 ...

按照作者的论文，pPH1JI是庆大霉素抗性的，和strep抗性毫无关系，而论文中描述EHA105是来源于EHA101就只是去了EHA101的卡纳抗性，但是没有带入其他的抗性，在构建的过程中还专门去掉了四环素的抗性，按照他的论文 EHA105是不带任何抗性标签的。我觉得这个作者肯定有个地方没说清楚。因为不带抗性标签的话，这么多代，Ti质粒还能在吗？
赞一下 回复此楼
10楼2015-03-20 22:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 XOooZzz 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +3 a089 2026-08-26 3/150 2026-08-26 23:21 by young90
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭