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银虫 (小有名气)

[交流] 请问农杆菌EHA105有链霉素抗性吗? 已有3人参与

如题。网上看了些资料说是这个菌株只抗利福平,但身边也有人说抗链霉素的。马上要做实验了,十分的不踏实呢....
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银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-03-18 17:31:30:
有条件的话自己试试看嘛。好像之前有人讨论过这个,楼主搜索下帖子吧。

本来就是要靠这个特性来判断手头上的菌种是不是这个菌株的....
已经看过前人的讨论了,有的人说有,有的人说没有,搞得我都晕了,然后才发这个贴的...

刚看到原作者对这个问题的回复了:
     It is true that EHA105 should have only rif-resistance (on the
chromosome).  However, when I made the strain, I used pPH1JI as an
eviction plasmid to do the double homologous recombination.  pPH1JI
encodes spec resistance.  We have a version of the strain that has
lost pPH1JI and is spec-sensitive.
     Sincerely,
     Stan

这么说是只有利福平抗性了?
3楼2012-03-18 18:06:34
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有条件的话自己试试看嘛。好像之前有人讨论过这个,楼主搜索下帖子吧。
2楼2012-03-18 17:31:30
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-03-18 18:06:34:
本来就是要靠这个特性来判断手头上的菌种是不是这个菌株的....
已经看过前人的讨论了,有的人说有,有的人说没有,搞得我都晕了,然后才发这个贴的...

刚看到原作者对这个问题的回复了:
     It is true t ...

……这个回复就纠结了。
作者说,本来呢,EHA105这东西,应该是只有Rif抗性的(染色体编码)。但是在做这菌株的时候使用了pPH1JI 这个驱逐质粒,pPH1JI 本身编码Spec抗性基因。所以:如果你的菌株不含pPH1JI 质粒,那么它就只有Rif抗性;如果含pPH1JI 质粒,那么就同时带Rif抗性和Spec抗性。
你可以检测下你的菌株含不含这个质粒就知道了。
另外,作者最后说,他们有确定不含pPH1JI质粒(不带Spec抗性)的EHA105,你也可以考虑问他要这个。
4楼2012-03-18 18:24:01
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银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-03-18 18:24:01:
……这个回复就纠结了。
作者说,本来呢,EHA105这东西,应该是只有Rif抗性的(染色体编码)。但是在做这菌株的时候使用了pPH1JI 这个驱逐质粒,pPH1JI 本身编码Spec抗性基因。所以:如果你的菌株不含pPH1JI 质 ...

哦,真多谢你翻译了一下呢,不然我真看得半懂不懂...
也就是说,Spec/Strep抗性不能作为EHA105的特征,而且该抗性基因也与辅助质粒无关咯。(?)实验室以前都用Strep养EHA105呢,看来以后是没有必要再加这个抗生素了。
5楼2012-03-18 23:23:20
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