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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家都是用的什么公司的点突变试剂盒啊？
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黑沉

金虫 (正式写手)

[交流] 大家都是用的什么公司的点突变试剂盒啊？ 已有6人参与

如题，我最近要开始构建很多个点突变的全长，想咨询一下大家，用哪个公司的试剂盒好些？！多谢……
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1楼 2012-03-14 21:11:03
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zfj20110603

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
7楼: Originally posted by 黑沉 at 2013-08-28 08:08:22
对啊，到目前为止已经做过20多个单点突变了，命中率至少3/4吧，前提是PCR能扩增出很亮的目的条带。我一般是PCR-回收纯化目的条带-DpnI处理1h-转化。过程其实很简单，就是看PCR这步，所以突变引物的质量很重要。希望 ...

你的模板是质粒吗？有多长啊？酶的话用的哪个公司的哪种酶啊？我以前用过试剂盒做过15k质粒的单点突变，结果试剂盒时间久了不好用了，他们公司也不生产了，现在有个不到7k的质粒要做突变，一直还没做出来呢。
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8楼2013-08-28 14:59:56
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黑沉

金虫 (正式写手)
stratagene quikchange的怎样？
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2楼2012-03-15 08:16:05
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黑沉

金虫 (正式写手)
没人指点下啊……
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3楼2012-03-16 21:18:42
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临风7071

木虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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2楼: Originally posted by 黑沉 at 2012-03-15 08:16:05:
stratagene quikchange的怎样？

那是非常好的试剂盒，国内的赛百盛也很好的
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4楼2012-03-17 11:17:31
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黑沉

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 临风7071 at 2012-03-17 11:17:31:
那是非常好的试剂盒，国内的赛百盛也很好的

谢啦，暂时先不用盒子了，直接买酶自己做咯……
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5楼2012-03-19 23:16:34
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zfj20110603

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 黑沉 at 2012-03-19 23:16:34
谢啦，暂时先不用盒子了，直接买酶自己做咯……...

楼主自己买酶做出来了吗？
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6楼2013-08-27 13:10:04
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黑沉

金虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by zfj20110603 at 2013-08-27 13:10:04
楼主自己买酶做出来了吗？...

对啊，到目前为止已经做过20多个单点突变了，命中率至少3/4吧，前提是PCR能扩增出很亮的目的条带。我一般是PCR-回收纯化目的条带-DpnI处理1h-转化。过程其实很简单，就是看PCR这步，所以突变引物的质量很重要。希望能帮到你……
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7楼2013-08-28 08:08:22
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黑沉

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zfj20110603 at 2013-08-28 14:59:56
你的模板是质粒吗？有多长啊？酶的话用的哪个公司的哪种酶啊？我以前用过试剂盒做过15k质粒的单点突变，结果试剂盒时间久了不好用了，他们公司也不生产了，现在有个不到7k的质粒要做突变，一直还没做出来呢。...

我的是8k,质粒，phusion超高保真。试剂盒太贵了……祝你顺利！
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9楼2013-08-28 15:43:29
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xiaoyan_feng

新虫 (初入文坛)
怎么设计引物啊
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10楼2014-07-14 14:36:43
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