24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2343  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Biochemical

铜虫 (初入文坛)

[求助] 离子交换层析求助

酯酶的分离纯化,酯酶来源于摩式摩根菌,采用的是传统的纯化策略。目前遇到了一个比较棘手的问题就是过柱子的时候挂不上去,阴离子DEAE,HIGH Q,缓冲液是TIS-HCI pH=8.5,结果都是活力大部分都在穿透峰。阳离子的是CM,缓冲液醋酸和醋酸钠pH=5.4,结果也是一样,活力也大部分在穿透。疏水柱:丁基 用了2M硫酸铵,也没有结合。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用离子交换,一个非常重要的因素就是你一定要知道目标蛋白的等电点,要不你摸索条件很困难的。
4楼2012-03-14 22:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

果断悉尼

铁杆木虫 (知名作家)

三沙市名誉常务副市长

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2012-03-14 18:12:38
非专业人士给点建议
1、可否考虑改变上样缓冲液的PH
2、可否考虑把穿透处理下 再去过一次柱子 这个时候或许竞争结合的杂质少了 目的蛋白的结合活性就强了
3、上样的样品可否处理下 比如盐析 除去大部分的其他杂蛋白等
我的微信号happyjk5208,谢绝闲聊
2楼2012-03-14 15:44:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jianqiangsui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你要分离的目的蛋白等电点是多少?在不知道等电点的情况下,建议你先用强阴或强阳离子交换剂探索纯化条件,先改变洗脱液的pH,洗脱液的浓度应尽量小
学海无涯
3楼2012-03-14 17:02:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liudt1105

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个一般是不知道等电点才发生的情况。。。。如果真是等电点不知道,建议你按照三楼说的试试摸索一下。
安琪酵母浸粉、蛋白胨,您实验的好助手
5楼2012-03-14 23:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂(085602,过四级,一志愿985) +15 化工人999 2026-04-04 15/750 2026-04-05 16:25 by 我是电风扇r
[考研] 332求调剂 +10 小小孟... 2026-04-05 10/500 2026-04-05 11:05 by 我的船我的海
[考研] 一志愿电子科技大学085600材料与化工 329分求调剂 +10 Naiko 2026-04-04 10/500 2026-04-05 09:40 by sam3303
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:08 by hemengdong
[考研] 321求调剂 +6 认真求上学 2026-04-03 6/300 2026-04-04 19:51 by dongzh2009
[考研] 一志愿华南师范361分,化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[考研] 一志愿双非085502,267分,过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +20 zchqwer 2026-04-01 22/1100 2026-04-03 22:09 by lglzsd
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 工科 267求调剂 +5 wanwan00 2026-04-02 7/350 2026-04-03 14:14 by zhangdingwa
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 286求调剂 +7 Faune 2026-03-30 7/350 2026-04-03 10:14 by linyelide
[考研] 279求调剂 +6 学而思兮知 2026-04-01 6/300 2026-04-02 09:16 by vgtyfty
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
[考研] 070300化学279求调剂 +15 哈哈哈^_^ 2026-03-31 17/850 2026-04-01 21:37 by 给你你注意休息
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-31 6/300 2026-04-01 11:02 by 逆水乘风
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
信息提示
请填处理意见