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关于SOD同工酶染色
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最近一直在做SOD同工酶电泳,对SOD同工酶的染色有诸多疑问,我采用的是NBT染色法,步骤如下: 1. 先将凝胶在黑暗中浸泡于2.45×10-3mol/LNBT溶液中20分钟, 2.然后再将凝胶在黑暗中放入含有0.028mol/LTEMED,2.8×10-5mol/L核黄素,0.036mol/L PH7.8磷酸缓冲液中浸泡15分钟, 3. 最后将凝胶浸泡在含有1×10-4mol/L EDTA的0.05mol/LPH7.8磷酸缓冲液中,用4000lx光照25-30分钟 不知道是不是我的方法有问题,我最后得到的酶带只有一条主带。而且很不清晰,一照相就看不出来了。 请各位帮我看看是不是我的染色配方有问题?NBT溶液的浓度是不是太大了? 另外能否帮忙那个推荐一下相关的英文文献?找了好久都没找到这样的英文文献。 非常感谢! |
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