24小时热门版块排行榜    

查看: 2534  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chenyu05

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于SOD同工酶染色

最近一直在做SOD同工酶电泳,对SOD同工酶的染色有诸多疑问,我采用的是NBT染色法,步骤如下:
1. 先将凝胶在黑暗中浸泡于2.45×10-3mol/LNBT溶液中20分钟,
  2.然后再将凝胶在黑暗中放入含有0.028mol/LTEMED,2.8×10-5mol/L核黄素,0.036mol/L PH7.8磷酸缓冲液中浸泡15分钟,
  3. 最后将凝胶浸泡在含有1×10-4mol/L EDTA的0.05mol/LPH7.8磷酸缓冲液中,用4000lx光照25-30分钟

不知道是不是我的方法有问题,我最后得到的酶带只有一条主带。而且很不清晰,一照相就看不出来了。
请各位帮我看看是不是我的染色配方有问题?NBT溶液的浓度是不是太大了?
另外能否帮忙那个推荐一下相关的英文文献?找了好久都没找到这样的英文文献。
非常感谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kikijin1988

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我昨天也按照这个方法做了SOD同工酶,跟你的结果一样。我考虑是不是制胶的过程出了问题。我的分离胶缓冲液ph8.9 2ml,浓缩胶缓冲液ph是6.8 1.25ml,30%ACR/BIS液分别是2.72ml、0.5ml,H2O分别是10.88ml、2.65ml,10%AP 0.16ml、0.05ml,TEMED分别是 0.016ml、0.004ml。请问现在你找到方法了吗?
3楼2013-06-18 13:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

sayaya

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-04-17 13:38:50
向你推荐 Francke 1979年发表于 PNAS 的方法:

1. 先将凝胶放入 50mM 磷酸缓冲液(pH7.8)中孵育10 分钟,中途换液一次;
2. 浸泡于 1 mg/ml 的NBT溶液中孵育 10分钟,
3 .然后再将凝胶在含有 3.25 mg/ml TEMED, 0.01 mg/ml 核黄素的 50 mM PH7.8磷酸缓冲液中浸泡10分钟,
4. 在荧光下可见清晰的SOD活性区域。
2楼2012-04-17 09:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sstefsun0630

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sayaya at 2012-04-17 09:48:32
向你推荐 Francke 1979年发表于 PNAS 的方法:

1. 先将凝胶放入 50mM 磷酸缓冲液(pH7.8)中孵育10 分钟,中途换液一次;
2. 浸泡于 1 mg/ml 的NBT溶液中孵育 10分钟,
3 .然后再将凝胶在含有 3.25 mg/ml TEME ...

你好,我想问你下你能提供一下PNAS上这篇文章的全名么?
4楼2014-06-18 20:28:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ninxia1

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2016-05-09 10:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +17 不知道叫什么! 2026-03-15 19/950 2026-03-19 15:06 by 尽舜尧1
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +3 llllkkkhh 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:22 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +3 Ncdx123456 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:18 by houyaoxu
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-18 9/450 2026-03-19 10:28 by 星空星月
[考研] 274求调剂 +6 S.H1 2026-03-18 6/300 2026-03-19 09:34 by 花店相见
[考研] 0703化学调剂 +8 妮妮ninicgb 2026-03-15 12/600 2026-03-19 05:55 by anny19840123
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见