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flyaway7585

金虫 (正式写手)


[交流] 肝脏RNA提取

提取肝脏(小鼠)的RNA时,大家有没有最后(异丙醇沉淀)出现沉淀太多,有很多蛋白?这种情况该怎么改进?
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flyaway7585

金虫 (正式写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-03-11 17:50:16:
那么在氯仿抽提的时候,上清取少一些,可以避免蛋白的污染。
其实一般来说,RNA产量不是问题,纯度更重要,特别是肝脏这种RNA含量丰富的样品。
1/3甚至1/4的上清就够了。如果还是有蛋白,可以考虑用氯仿抽提2次 ...

ok,谢谢
7楼2012-03-27 10:17:17
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)



flyaway7585(金币+1):谢谢参与
肝脏是RNA含量很高的组织之一,异丙醇出现白色沉淀很正常,建议楼主提RNA时,用少量组织即可,50-100mg
2楼2012-03-11 09:06:41
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flyaway7585

金虫 (正式写手)


引用回帖:
: Originally posted by zqk0532 at 2012-03-11 09:06:41:
肝脏是RNA含量很高的组织之一,异丙醇出现白色沉淀很正常,建议楼主提RNA时,用少量组织即可,50-100mg

谢谢,白色沉淀太多可能是蛋白质杂质,我试试减少组织量,看能不能少点蛋白杂质。
3楼2012-03-11 12:22:16
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★ ★ ★
flyaway7585(金币+1):谢谢参与
小丹木木(金币+2, 专家考核): 有道理,我提的也能看到啊 2012-03-12 10:01:08
是不是蛋白你要看OD260/OD280的值。
纯的RNA量大的时候也会有肉眼可见的白色沉淀滴,我提RNA几乎每次都有。看不到沉淀块时得到的RNA量就很少,2、3微克左右的量就形不成沉淀块了。
4楼2012-03-11 16:44:34
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