24小时热门版块排行榜    

查看: 1808  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yuechuan86

银虫 (初入文坛)

[求助] 请教3'-RACE怎么扩增不到全长

小弟,在做RACE扩增cDNA,5'已获得,根据测序结果设计引物,3‘-RACE扩增却得不到目标片段,要么扩增不出来,要么扩增出来的太小,目标700bp,扩出来只有300bp。望各位大虾多多指教哪!!!小弟感激不尽!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdfish860907

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那你就用半巢式或者降落pcr试试,因为3‘有polyA和3’UTR序列,很难预测3’的长度

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-02-29 11:45:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

hdfish860907

铁虫 (初入文坛)

amisking(金币+5): 鼓励新虫发帖交流! 2012-02-28 18:13:59
要用好的cdna一链和特异性好的引物

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-02-28 17:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuechuan86

银虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by hdfish860907 at 2012-02-28 17:16:48:
要用好的cdna一链和特异性好的引物

用的cDNA应该没问题,做其他的都可以扩出来,引物已经试了10个有余了,有的没有产物,有的很短。咋办呢?
3楼2012-02-28 18:50:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuechuan86

银虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by hdfish860907 at 2012-02-29 11:45:36:
那你就用半巢式或者降落pcr试试,因为3‘有polyA和3’UTR序列,很难预测3’的长度

这个倒是可以试试,谢谢指点哈
5楼2012-02-29 15:56:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 8/400 2026-08-25 05:12 by BZKMTicpDhFj
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见