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yuechuan86

银虫 (初入文坛)

[求助] 请教3'-RACE怎么扩增不到全长

小弟,在做RACE扩增cDNA,5'已获得,根据测序结果设计引物,3‘-RACE扩增却得不到目标片段,要么扩增不出来,要么扩增出来的太小,目标700bp,扩出来只有300bp。望各位大虾多多指教哪!!!小弟感激不尽!!!
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hdfish860907

铁虫 (初入文坛)

amisking(金币+5): 鼓励新虫发帖交流! 2012-02-28 18:13:59
要用好的cdna一链和特异性好的引物

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2楼2012-02-28 17:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdfish860907

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那你就用半巢式或者降落pcr试试,因为3‘有polyA和3’UTR序列,很难预测3’的长度

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-02-29 11:45:36
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