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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】cDNA在进行同源扩增之后，不进行RACE还有那些方法得到全序列？
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lwzxl007

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】cDNA在进行同源扩增之后，不进行RACE还有那些方法得到全序列？已有8人参与

RACE试剂盒太贵了，还有什么方法得到cDNA全长？请教大家，容易点的，花钱少的
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1楼2011-01-05 13:54:40
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 17:47:21
看看能不能进行电子克隆，3‘的还好说，主要是5’末端的序列，电子克隆不能获得全长的话，只能进行RACE了
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2楼2011-01-05 14:13:06
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大白菜123789

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 17:47:25
可以不用试剂盒，买相关试剂自己做，很省钱，效果也很好，实验室一直这么做
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3楼2011-01-05 16:19:19
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shourjruo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 大白菜123789 at 2011-01-05 16:19:19:
可以不用试剂盒，买相关试剂自己做，很省钱，效果也很好，实验室一直这么做

能否详细说说？
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当思考成为习惯，成功将不期而至。
4楼2011-01-06 12:37:35
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
3'可以，但5‘端的如果没有特殊的方法应该弄不全吧。
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5楼2011-01-06 12:52:51
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yoyoyoyo3985

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-06 15:32:16
基因够保守就可以吧，从两端设计引物直接pcr出来。也可以分段来，我刚将一个基因分了三段做出来了。开始的时候直接从两端设计引物，PCR得不到产物，中间设的引物可以，然后得到中间后再分别往两端扩，都得到了，呵呵
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菜鸟木木
难免埋怨时间的手，把相爱写成相爱过
6楼2011-01-06 13:47:42
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lwzxl007

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shourjruo at 2011-01-06 12:37:35:


能否详细说说？

支持，我觉得这个可以不用保密
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7楼2011-01-06 16:24:21
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菜鸟木木

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
引用回帖:
30197楼: Originally posted by yoyoyoyo3985 at 2011-01-06 13:47:42
基因够保守就可以吧，从两端设计引物直接pcr出来。也可以分段来，我刚将一个基因分了三段做出来了。开始的时候直接从两端设计引物，PCR得不到产物，中间设的引物可以，然后得到中间后再分别往两端扩，都得到了，呵呵

我也是开始的时候直接从两端设计引物，PCR得不到产物，中间设的引物可以，请问怎样怎样往两端扩啊？
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8楼2012-06-27 11:39:35
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labixiaotao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我克隆的是葡萄的基因，但是在ncbi和genoscope上公布的这个基因序列不一样，应该怎么办啊
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9楼2013-04-07 16:39:21
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