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lwzxl007

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】cDNA在进行同源扩增之后,不进行RACE还有那些方法得到全序列? 已有8人参与

RACE试剂盒太贵了,还有什么方法得到cDNA全长?请教大家,容易点的,花钱少的
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tiani_tan

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 17:47:21
看看能不能进行电子克隆,3‘的还好说,主要是5’末端的序列,电子克隆不能获得全长的话,只能进行RACE了
2楼2011-01-05 14:13:06
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大白菜123789

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 17:47:25
可以不用试剂盒,买相关试剂自己做,很省钱,效果也很好,实验室一直这么做
3楼2011-01-05 16:19:19
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shourjruo

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 大白菜123789 at 2011-01-05 16:19:19:
可以不用试剂盒,买相关试剂自己做,很省钱,效果也很好,实验室一直这么做

能否详细说说?
当思考成为习惯,成功将不期而至。
4楼2011-01-06 12:37:35
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amilie030312

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
3'可以,但5‘端的如果没有特殊的方法应该弄不全吧。
5楼2011-01-06 12:52:51
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yoyoyoyo3985

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-06 15:32:16
基因够保守就可以吧,从两端设计引物直接pcr出来。也可以分段来,我刚将一个基因分了三段做出来了。开始的时候直接从两端设计引物,PCR得不到产物,中间设的引物可以,然后得到中间后再分别往两端扩,都得到了,呵呵

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

难免埋怨时间的手,把相爱写成相爱过
6楼2011-01-06 13:47:42
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lwzxl007

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by shourjruo at 2011-01-06 12:37:35:


能否详细说说?

支持,我觉得这个可以不用保密
7楼2011-01-06 16:24:21
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菜鸟木木

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
引用回帖:
30197楼: Originally posted by yoyoyoyo3985 at 2011-01-06 13:47:42
基因够保守就可以吧,从两端设计引物直接pcr出来。也可以分段来,我刚将一个基因分了三段做出来了。开始的时候直接从两端设计引物,PCR得不到产物,中间设的引物可以,然后得到中间后再分别往两端扩,都得到了,呵呵

我也是开始的时候直接从两端设计引物,PCR得不到产物,中间设的引物可以,请问怎样怎样往两端扩啊?
8楼2012-06-27 11:39:35
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labixiaotao

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我克隆的是葡萄的基因,但是在ncbi和genoscope上公布的这个基因序列不一样,应该怎么办啊
9楼2013-04-07 16:39:21
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