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nan_nan_2012

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么最近做连接转化总是失败

本人最近用TaKaRa的pMD18-T Vector做连接转化,感受态用过自己做的和别人做的都不长菌落,也用过买的感受态,只长了不到10个菌落挑单克隆后做菌液PCR检测发现都是空载,请问是什么原因?请各位高手指教一下!!谢啦!(我的回收产物大小在600~700bp之间,回收产物4ul,载体1ul,SolutionI 5ul,16°C连接1h)
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艰苦温度

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by zoeye at 2012-02-26 01:05:39
1、可以先用感受态转质粒看看 检查下是不是感受态的问题
2、新倒一批板 排除板的问题
3、连接比例 如果我没记错的话 应该是
(载体用量 如:100ng)/载体碱基数:T载大小)/(片段用量/片段碱基数600bp)=1:3 这 ...

请问加A是什么意思啊?
20楼2014-01-09 13:24:47
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