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zoeye

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+3, MolEPI+1): 很有用哦 2012-02-27 10:50:18
1、可以先用感受态转质粒看看 检查下是不是感受态的问题
2、新倒一批板 排除板的问题
3、连接比例 如果我没记错的话 应该是
(载体用量 如:100ng)/载体碱基数:T载大小)/(片段用量/片段碱基数600bp)=1:3 这个公式算一下(应该是的 建议你查一下 我经常会把两个比例记反)
4、你应该是用Taq酶P的吧 不是的话记得要加A~~~
5、连接时间 我一般都是4°过夜的 如果楼主不急 就延长一下连接时间吧
6、多转一点吧 虽然我也是转的10微升 你就转20好了
TaKaRa的pMD18-T Vector我一直在用 觉得很好用 很好构的
建议楼主在连接的时候可以把载体片段的量多做几管 不同比例 然后分别转化 看看会不会好一点
希望对你有帮助
12楼2012-02-26 01:05:39
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