应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌 平菇 RNA如何提取，为什么凝胶检测有四条带
151/2返回列表12下一页
查看: 3425  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yinchaomin

新虫 (小有名气)

[求助] 真菌 平菇 RNA如何提取，为什么凝胶检测有四条带

最近小弟在提平菇菌丝RNA，不知道什么原因，提出的RNA经凝胶检测有四条带，且带不是很亮，已经好几次是这样的状况了，急得很。请各位大侠帮帮忙，看看是怎么回事，用的是takara的tri-zol 经液氮研磨提取的，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-23 20:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xiaoj9663

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
yinchaomin(金币+1): ★有帮助 2012-02-25 21:05:14
看图的话拖带很严重，胶孔还有杂质残留，说明RNA提的不纯，蛋白质多糖残留过多。

另外我怀疑你的电泳上样量有点大，建议用这次1/5和1/10的RNA量再跑次电泳试试
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yinchaomin
4楼2012-02-25 11:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

tanche163

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
貌似有多糖什么的，你可以在沉淀那一步加点盐试试，具体搜索protocol
赞一下 回复此楼
阳光总在风雨后
2楼2012-02-24 11:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
yinchaomin(金币+1): ★有帮助 2012-02-25 21:06:53
hi ,你能不能将你的RNA纯化一下，然后走一个比较好的胶，看看是不是还是四条带？  还有，有没有其它的报道说你这个材料分离出来的total RNA是这样的四条带的？
赞一下 回复此楼
致良知
3楼2012-02-24 23:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lillian菲

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你提取的RNA应该不纯，那四条带中应该有混合物的条带，如果要得到漂亮的条带，最好纯化一下
赞一下 回复此楼
5楼2012-02-25 14:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinchaomin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by tanche163 at 2012-02-24 11:41:26:
貌似有多糖什么的，你可以在沉淀那一步加点盐试试，具体搜索protocol

提取过程中已经加入了0.8M柠檬酸钠盐+1.2M Nacl 的盐溶液沉淀过了，最后还是这样，都提了一个多月了，真郁闷！还是要谢谢你，呵呵~~
赞一下 回复此楼
6楼2012-02-25 20:51:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinchaomin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-02-24 23:37:22:
hi ,你能不能将你的RNA纯化一下，然后走一个比较好的胶，看看是不是还是四条带？  还有，有没有其它的报道说你这个材料分离出来的total RNA是这样的四条带的？

提了好几次，都是这样，以前有师兄提过，都是明显的3条带，我都提了一个多月了，一直是这样，参考文献里也没有出现4条带的现象。谢谢~~
赞一下 回复此楼
7楼2012-02-25 20:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinchaomin

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by xiaoj9663 at 2012-02-25 11:26:22:
看图的话拖带很严重，胶孔还有杂质残留，说明RNA提的不纯，蛋白质多糖残留过多。

另外我怀疑你的电泳上样量有点大，建议用这次1/5和1/10的RNA量再跑次电泳试试

到底为什么会托带啊，仁兄，能讲明白点不？我用的枪头啥的都是公司里面买的，应该没什么问题呀！！
赞一下 回复此楼
8楼2012-02-25 21:02:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinchaomin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-02-25 14:02:10:
你提取的RNA应该不纯，那四条带中应该有混合物的条带，如果要得到漂亮的条带，最好纯化一下

应该不纯，就是不知道问题出在哪里，真郁闷，但还是要谢谢你，呵呵~~
赞一下 回复此楼
9楼2012-02-25 21:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoj9663

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yinchaomin at 2012-02-25 21:02:31:
到底为什么会托带啊，仁兄，能讲明白点不？我用的枪头啥的都是公司里面买的，应该没什么问题呀！！

拖带一般是有杂质造成的，杂质在跑电泳过程中残留在胶里形成拖带。另外RNA降解也有可能造成的弥散性条带。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yinchaomin
10楼2012-02-26 00:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yinchaomin 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖？ +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭