24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
查看: 2805  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yinchaomin

新虫 (小有名气)

[求助] 真菌 平菇 RNA如何提取,为什么凝胶检测有四条带

最近小弟在提平菇菌丝RNA,不知道什么原因,提出的RNA经凝胶检测有四条带,且带不是很亮,已经好几次是这样的状况了,急得很。请各位大侠帮帮忙,看看是怎么回事,用的是takara的tri-zol 经液氮研磨提取的,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinchaomin

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by xiaoj9663 at 2012-02-26 00:05:49:
拖带一般是有杂质造成的,杂质在跑电泳过程中残留在胶里形成拖带。另外RNA降解也有可能造成的弥散性条带。

想问下大侠,一般的tri-zol 应该没什么问题吧?实验中所有的东西都换过,除了tri-zol没换,是takara的,日期要到13年才过期,平时都是4度保存的,应该不会坏吧?老板让我重新买一瓶,我也不知道哪个公司的比较好,能推荐下不?谢谢
13楼2012-02-28 10:17:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

tanche163

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
貌似有多糖什么的,你可以在沉淀那一步加点盐试试,具体搜索protocol
阳光总在风雨后
2楼2012-02-24 11:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
yinchaomin(金币+1): 有帮助 2012-02-25 21:06:53
hi ,你能不能将你的RNA纯化一下,然后走一个比较好的胶,看看是不是还是四条带?  还有,有没有其它的报道说你这个材料分离出来的total RNA是这样的四条带的?
致良知
3楼2012-02-24 23:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoj9663

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
yinchaomin(金币+1): 有帮助 2012-02-25 21:05:14
看图的话拖带很严重,胶孔还有杂质残留,说明RNA提的不纯,蛋白质多糖残留过多。

另外我怀疑你的电泳上样量有点大,建议用这次1/5和1/10的RNA量再跑次电泳试试

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-02-25 11:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见